Question

10．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株．回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上．从功能上讲，该培养基属于选择培养基．
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法．接种时所用的接种环通过灼烧灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力强．
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染．

Answer 1

分析 （1）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法．
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法．
（2）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．

解答 解：（1）欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其它碳源，不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基．
（2）分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种．接种时所用的接种环通过灼烧灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，从而将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（3）降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大．
（4）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）、高压蒸汽灭菌（如培养基）等．无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染．
故答案为：
（1）原油 　选择　
（2）平板划线法   　稀释涂布平板法   　灼烧   　上一次划线的末端        将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落　　
（3）强
（4）干热灭菌   　高压蒸汽灭菌    　火焰

点评 本题考查了微生物的分离与培养以及培养基对微生物的选择作用，要求考生能够掌握微生物培养过程中的无菌技术的主要内容，识记微生物分离与纯化常用接种方法，根据培养的要求确定选择培养基的成分等．