Question

8．某重点实验室课题研究组欲将一株野生杂草的抗病基因转给一双子叶农作物．该农作物含有高茎基因，植株过高容易倒伏，科学家欲通过基因工程操作抑制高茎基因的表达．结合所学知识分析下列问题：
（1）课题研究组已经获得了抗性基因，欲体外大量扩增该目的基因需采用PCR技术，该技术的基本反应过程：目的基因受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在Taq热稳定性DNA聚合酶的作用下进行延伸．
（2）该基因工程操作的核心是基因表达载体的构建．本研究中，欲将目的基因转入受体细胞，常采用农杆菌转化法．科学家将高茎基因的反义基因转入受体细胞，该基因产生的mRNA能够与高茎基因转录出的mRNA互补结合，形成双链RNA，抑制高茎基因的表达．

Answer 1

分析 1、PCR技术的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．
2、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．

解答 解：（1）体外扩增目的基因可采用PCR技术，其过程为：目的基因受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合形成局部双链，然后在Taq热稳定性DNA聚合酶的作用下进行延伸．
（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．将目的基因转入植物细胞常用农杆菌转化法．反义基因产生的mRNA能够与高茎基因转录出的mRNA互补结合，形成双链RNA，抑制基因表达的翻译过程．
故答案为：
（1）PCR    变性   引物    Taq热稳定性   延伸
（2）基因表达载体的构建   农杆菌转化
（3）反义   双链RNA

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记PCR技术的概念、原理、条件及过程；识记基因工程的操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．