Question

17．请分析回答下列有关生物技术实践的问题：
（1）制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时，倒平板操作的步骤是：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上．
（2）称量时，牛肉膏由于比较黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量．牛肉膏和蛋白胨由于易吸潮，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖．
（3）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外，还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求．
（4）纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶酶，一般认为它至少包括三种组分，纤维素分解菌的筛选一般用刚果红染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选．
（5）植物的组织培养除需营养和激素外，pH、温度、光照等外界条件也很重要．
（6）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染．常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌
（7）进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培．花药离体培养时，选择单核期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是醋酸洋红法．花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比．

Answer 1

分析 1、培养基的主要成分包括：碳源、氮源、水、无机盐等．
2、培养基配制时的注意事项
①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板．
③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．
④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生．
3、实验室常用的灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌．
4、纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素范围葡萄糖．纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌．

解答 解：（1）倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染．
（2）称量时，牛肉膏由于比较黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量．牛肉膏和蛋白胨由于易吸潮，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖．
（3）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外，还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求．
（4）纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌．
（5）植物的组织培养除需营养和激素外，pH、温度、光照等外界条件也很重要．
（6）常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和 高压蒸汽灭菌
（7）进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培．花药离体培养时，选择单核期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是醋酸洋红法．花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比．
故答案为：
（1）棉塞  培养基  凝固  皿盖  皿底
（2）玻璃棒  称量纸  易吸潮
（3）碳源  氮源  PH  氧气
（4）纤维素酶  复合酶  刚果红染色
（5）pH 温度 光照
（6）灼烧、高压蒸汽
（7）外植体消毒  单核  醋酸洋红法 激素的种类及其浓度配比

点评 本题综合考查了生物技术实践的有关知识，具有一定的综合性，然而知识点较简单，要求考生能够识记培养基的成分、制备方法、倒平板的步骤等，识记纤维素酶的种类以及细菌鉴定的方法，再结合所学知识准确答题．