Question

（9分）某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_________。
（2）在动物细胞培养时，为了补充合成培养基中缺乏的物质，通常在合成培养基中加入适量的           。细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是___________________。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长____________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A．B两组，A组细胞培养液中加入___________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A．B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A．B两组细胞中的________或_______合成水平的差异，确定Y的药效。

Answer 1

（1）多                     （2）动物血清   维持培养液pH
（3）停止   多   胰蛋白酶 （4）Y    mRNA   蛋白质

解析试题分析：
（1）因为甲细胞是癌细胞，没有接触性抑制，所以一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量多；
（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量动物血清，因动物细胞所需要的有些物质还不清楚；细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是维持培养液pH；
（3）乙细胞铺满瓶壁时，其生长停止，因发生了接触抑制；甲细胞比乙细胞可以传代的次数更多；肝脏组织块制备肝细胞悬液用胰蛋白酶消化处理，使细胞分散开，以利于培养；
（4）A组细胞培养液中加入Y作为实验组；通过分别检测X基因在A．B两组细胞中的转录产物mRNA或表达产物相应的蛋白质合成水平的差异，进而确定Y的药效。
考点：本题考查动物细胞培养的内容，意在考查考生对所学知识的理解并把握知识间的内在联系。