Question

16．克隆猪成功的概率较低，与早期胚胎细胞异常凋亡有关．Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系．克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图．

（1）图中应选择减数第二次分裂中期（或MⅡ中）期的卵母细胞进行核移植，使用的良种猪体细胞一般都选择10代以内的细胞，原因是10代以内的细胞可保证正常的二倍体核型．
（2）图中X表示反转录过程，从基因组数据库中查询Bcl-2基因的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成引物用于PCR扩增，PCR的原理是DNA双链复制．
在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数，从而反映出Bcl-2基因的转录水平．
（3）需将早期胚胎在体外培养到桑椹胚或囊胚时期，再移入到受体子宫，培育成克隆猪．
（4）克隆猪的性状与良种猪的性状不完全相同的原因是①克隆动物细胞质遗传物质来自受体卵母细胞
②性状是基因与环境共同作用的结果
③个体发育过程中有可能发生基因突变．

Answer 1

分析 分析题图：图示为克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程图，首先采用核移植技术，即将良种猪体细胞核移植到去核卵细胞中形成重组细胞；然后采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；X表示以mRNA为模板逆转录形成cDNA的过程．

解答 解：（1）进行核移植时，应选择减数第二次分裂中期（或MⅡ中）期的卵母细胞进行核移植；由于10代以内的细胞可保证正常的二倍体核型，因此使用的良种猪体细胞一般都选择10代以内的细胞．
（2）图中X表示以mRNA为模板逆转录形成cDNA的过程．从基因组数据库中查询Bcl-2基因的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成引物用于PCR扩增，PCR的原理是DNA双链复制．在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数，由于mRNA是通过转录形成的，因此这能反映出Bcl-2基因的转录水平．
（3）需将早期胚胎在体外培养到桑椹胚或囊胚时期，再移入到受体子宫，培育成克隆猪．
（4）克隆猪的性状与良种猪的性状不完全相同的原因是：
①克隆动物细胞质遗传物质来自受体卵母细胞；
②性状是基因与环境共同作用的结果；
③个体发育过程中有可能发生基因突变．
故答案为：
（1）减数第二次分裂中期（或MⅡ中）       10代以内的细胞可保证正常的二倍体核型
（2）反转录    引物     DNA双链复制       Bcl-2基因的转录水平
（3）桑椹胚或囊胚
（4）①克隆动物细胞质遗传物质来自受体卵母细胞
②性状是基因与环境共同作用的结果
③个体发育过程中有可能发生基因突变

点评 本题结合克隆猪的培育过程图，考查动物体细胞核移植、动物细胞培养、PCR扩增技术的应用，要求考生识记动物体细胞核移植的概念、原理及过程，能准确判断图中各过程的名称；识记PCR技术的原理和条件，能结合题干信息答题．