Question

2．饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用．若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等．以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸梅的菌株的过程示意图．请分析作答．

（1）图示培养基中除了添加植酸钙以外，应含有碳源、氮源、水、其他无机盐等基本营养物质．
（2）接种以前要进行系列稀释操作，目的是在固体供养基表面形成单个菌落．根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数．通常每种稀释液需涂布三个平板，取其平均值．若将最后一个试管中的菌液每次吸取 0．lmL涂布培养后获得平均值是48个菌落，则lg土壤中含有此菌的菌株数是4.8×10⁷．
（3）在样品稀释和涂布平板步骤中，下到选项不需要的是③（填序号）．
①酒精    ②培养皿   ③显微镜    ④无菌水
（4）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果．
（5）产值酸梅的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产值酸酶．图中降解圈大小与植酸酶的量与活性有关．实验结果显示A-E五种菌株中，E是产值酸酶最理想的菌株．分离并获得菌种后，若需长期保存，应使用甘油管藏法．

Answer 1

分析 1、稀释平板法在培养基上分离、培养出微生物的单个菌落，以便于计数、移植、分离，从而达到纯培养的目的．
2、选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长．由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．

解答 解：（1）从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株需要使用含植酸钙的选择培养基，培养基中应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质?
（2）接种以前要进行的一系列操作，即稀释平板法培养出微生物的单个菌落，达到纯培养的目的．采用稀释涂布平板法进行微生物的计数时需要至少3个平板统计平板上的菌落数取其平均值．最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是48则1g土壤中含有活菌数为48×10×10³×10²═4.8×10⁷?
（3）在样品稀释和涂布平板步骤中需要进行消毒，使用酒精，稀释涂布平板需要培养皿和无菌水，但不需要显微镜．故选：③．
（4）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果．
（5）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域．根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶及降解圈大小与植酸酶的量与活性有关，故图中E是产植酸酶最理想的菌株?长期保存菌种，应使用甘油管藏法．
故答案为：
（1）植酸钙
（2）单个菌落  菌落数      4.8×10⁷ 
（3）③
（4）培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果（不易培养得到单个菌落）
（5）量与活性     E   甘油管藏

点评 本题综合微生物的培养及实验设计和分析能力，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，对实验现象和结果进行解释、分析、处理．