Question

17．下列有关细胞工程的说法正确的是（　　）

• A． 在愈伤组织形成过程中，需适宜的温度、pH和无菌条件，无需添加植物激素
• B． 植物体细胞杂交前需要用酶去除细胞壁获得原生质体，然后再用聚乙二醇促进融合
• C． 在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胃蛋白酶处理
• D． 动物细胞培养应在含5%CO₂的恒温箱中培养，CO₂的作用是为细胞提供碳源

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．

解答 解：A、植物细胞在离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）、一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）会脱分化形成愈伤组织，A错误．
B、诱导植物细胞融合的方法：物理法：离心、振动、电激．化学法：聚乙二醇（PEG），B正确．
C、在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬浮液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，C错误；
D、细胞培养应在含5%CO₂的恒温箱中进行，CO₂的作用是维持培养基的pH，D错误．
故选：B．

点评 本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的具体过程，掌握动物细胞培养所需的条件，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查．