Question

5．请回答下列与微生物的分离、培养等有关的问题：
（1）某培养基的配方：KH₂PO₄、NaNO₃、MgSO₄•7H₂O、KCl、葡萄糖、H₂O．如果使用该培养基来筛选土壤中分解尿素的细菌，则应去除的成分是NaNO₃，同时需要添加的成分是尿素．
（2）琼脂是从海藻中分离获得的多糖物质，在培养基中常常需要加入琼脂，其作用是作为凝固剂．
（3）如图表示的微生物接种方法称为平板划线法，图示接种需要对接种环采用灼烧灭菌，先后灭菌6次．
（4）已知稀释倍数为10⁶（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL），平板上分解尿素的细菌菌落数的平均值为233，则每毫升样品中菌落数是1.165×10⁹个．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、分解尿素的细菌都能合成脲酶，因此可以选用以尿素为唯一氮源的培养基来分离细菌，这样就尽可能使培养基中只含有尿素这一种含氮化合物，有利于对这种细菌的筛选．

解答 解：（1）根据培养基配方可知，题干所给的培养基配方中氮源是NaNO₃，若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应该使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，即需要去除NaNO₃，同时需要添加尿素．
（2）在培养基中常常需要加入琼脂，其作用是作为凝固剂．
（3）如图表示的微生物接种方法称为平板划线法，图示接种需要对接种环采用灼烧灭菌，由于每次划线前后均需要灼烧灭菌，因此需要先后灭菌 6次．
（4）根据题意可知，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=233÷0.2×10⁶=1.165×10⁹个．
故答案为：
（1）NaNO₃    尿素
（2）作为凝固剂
（3）平板划线法    灼烧    6
（4）1.165×10⁹个

点评 本题主要考查微生物接种方法、尿素分解菌的分离等相关知识，意在强化学生对相关知识的识记、理解与运用．