Question

在有氧气和ATP的条件下，荧光素酶能催化荧光素的氧化而发出荧光．请根据以下提供的实验材料，完善实验思路，并回答有关问题．
实验材料：荧光素甲溶液，荧光素乙溶液，荧光素酶A溶液，荧光素酶B溶液，ATP溶液．
（1）现欲探究“不同的荧光素酶是否都能催化不同的荧光素氧化”．请完善实验思路．
实验步骤：
①取4支试管，编号1、2、3、4；
②1、2号试管加入适量荧光素甲溶液，3、4号试管加入等量荧光素乙溶液
③

 

号试管加入适量荧光素酶A溶液，

 

号试管加入等量荧光素酶B溶液；
④

 

⑤在暗处观察各试管是否发出荧光．
实验结果预测及结论：
若实验结果为

 

，则支持“不同的荧光素酶都能催化不同的荧光素氧化”．否则不支持“不同的荧光素酶都能催化不同的荧光素氧化”．该实验思路也可用于探究酶的

 

特性．
（2）在有一定量的某种荧光素-荧光素酶混合液的测试管中，加入适量不同浓度的ATP溶液，然后把测试管放入荧光光度仪测荧光素发出的荧光强度，结果如图．上述方法可用来测量各种细胞内的ATP含量，衰老细胞的荧光强度应比同类正常细胞

 

，在测定细胞内ATP含量时需制备细胞匀浆，由曲线可知，必须注意

 

．

Answer 1

考点：酶在代谢中的作用的综合,ATP在能量代谢中的作用的综合

专题：

分析：注意实验的对照性原则，根据实验目的综合考虑实验步骤和分析相关的实验结果．

解答： 解：（1）③1、3号与2、4号试管应加入不同的酶溶液，以形成对照．
④在4支试管中加入适量且等量的ATP溶液，以提供能量．
⑤若实验结果为4支试管都发出荧光，则支持“不同的荧光素酶都能催化不同的荧光素氧化”． 该实验思路也可用于探究酶的专一性特性．
（2）衰老细胞中ATP的含量较少，所以荧光强度小，由曲线可知，制备细胞匀浆时必须注意匀浆的浓度要合适．
故答案为：
（1）③1、3   2、4      ④4支试管加入适量且等量的ATP溶液       ⑤4支试管都发出荧光    专一性
（2）小     匀浆的浓度要合适

点评：本题为实验设计的典型题目，对实验步骤和结果预测的考查很到位且难度适中．