Question

17．复性温度是影响PCR特异性的较重要因素．变性后温度冷却至40℃～60℃，可使引物和模板发生结合．PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合，原因不包括（　　）

• A． 由于模板DNA比引物复杂得多
• B． 引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞
• C． 模板链加热解旋已经变性不可能再次结合
• D． 加入引物的量足够多而模板链数量少

Answer 1

分析 PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
2、原理：DNA复制．
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．

解答 解：A、由于模板DNA比引物复杂得多，因此PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合，A正确；
B、由于引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，因此PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合，B正确；
C、模板链加热解旋变性后，在降低温度的情况下还能再次结合，C错误；
D、由于加入引物的量足够多而模板链数量少，因此PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合，D正确．
故选：C．

点评 本题考查PCR技术的相关知识，要求考生识记PCR技术的原理、概念、条件及过程，能结合所学的知识准确判断各选项．