题目内容
【题目】图一是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
(1)过程②是 ,需要的酶是 。③④⑤代表 技术，需要的酶是 ,该酶的特点是 。
(2)过程⑧需要使用 (药剂）处理D,使之更容易吸收C。
(3)图二是运载体和胰岛素基因的某个片段，已知限制酶I的识别序列和切点是一G↓GATCC—，限制酶II的识别序列和切点是一↓GATC—。GeneⅠ和GeneⅡ为标记基因，根据图示判断下列有关两者拼接的操作正确的是 。
A.质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶II切割
B.质粒用限制酶II切割，目的基因用限制酶I切割
C.目的基因和质粒均用限制酶I切割
D.目的基因和质粒均用限制酶II切割
(4)人基因可以和大肠杆菌基因拼接在一起，是因为 。人胰岛素基因能在大肠杆菌中表达出人胰岛素是因为 ,大肠杆菌是否合成了人胰岛素，检测的方法是 。
【答案】（1）逆转录 逆转录酶 PCR 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 耐高温
（2）氯化钙（钙离子）
（3）A
（4）DNA分子的结构都是由四种脱氧核苷酸构成的
人和大肠杆菌共用一套遗传密码 抗原—抗体杂交法
【解析】（1）②是以mRNA为模板逆转录形成DNA，需要逆转录酶；③④⑤反复复制DNA，所用技术为PCR，体外复制是通过高温使得DNA双链解旋，因此需要耐高温的酶，该酶为热稳定DNA聚合酶。
(2)过程⑧需要使用氯化钙）处理，使得D受体细胞的细胞膜通透性增强，使之更容易吸收C重组质粒。
（3）由图可知，质粒上的两个标记基因中均有限制酶Ⅱ（-↓GATC-）的识别序列和切点，若用该酶切割会将两个标记基因均破坏，因此只能用限制酶Ⅰ切割质粒，但切割含有抗虫基因的外源DNA分子时可以只用限制酶Ⅱ，也可以同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ．故选A．
（4）因为DNA分子都是独特的双螺旋结构，都是由四种脱氧核苷酸，所以不同生物的基因可以拼接在一起. 由于不同的生物共用一套遗传密码，因此胰岛素基因能在大肠杆菌细胞内成功表达。检测大肠杆菌是否合成了人胰岛素，方法可以用抗原—抗体杂交法。
