Question

13．基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗的目的．干扰素基因缺失的小鼠不能产生成熟淋巴细胞，科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的小鼠进行了基因治疗．请回答：
（1）为使干扰素基因在小鼠细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入基因表达载体的启动子和终止子之间．
（2）将干扰素基因导入ES细胞的方法是显微注射技术，采用DNA分子杂交可以鉴定目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA分子上，再将能正常表达干扰素的细胞转入到小鼠体内，这种治疗方法称为体外基因治疗．导入ES细胞而不是导入上皮细胞是因为ES细胞在功能上具有发育的全能性．
（3）干扰素基因缺失的小鼠易患某种细菌导致的肺炎，引起这种现象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴细胞，降低了小鼠免疫系统的防卫功能．
（4）用于基因治疗的基因有三类，一类是把正常基因导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来治疗，第二类是反义基因，即通过产生的mRNA分子与病变基因产生的mRNA进行互补结合，来阻断非正常蛋白质的合成；第三类是编码可以杀死癌细胞的蛋白酶基因．

Answer 1

分析 1、基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因．启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端
2、目的基因的检测与鉴定：
（1）分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
3、反义基因，即通过产生的mRNA分子，与病变基因产生的mRNA进行互补，来阻止合成非正常蛋白质．

解答 解：（1）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因．启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端．因此，为使干扰素基因在小鼠细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入基因表达载体的启动子和终止子之间．
（2）在基因工程中，受体细胞是动物细胞，因此将干扰素基因导入ES细胞的方法是显微注射技术．检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因的方法是DNA分子杂交技术；将能正常表达干扰素的细胞转入到小鼠体内，这种治疗方法称为体外基因治疗；ES细胞在功能上具有发育的全能性．
（3）小鼠缺少成熟的淋巴细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能．
（4）反义基因，即通过产生的mRNA分子，与病变基因产生的mRNA进行互补，来阻止合成非正常蛋白质．
故答案为：
（1）启动子    终止子
（2）显微注射技术  DNA分子杂交    体外基因治疗    发育的全能性
（3）防卫
（4）mRNA

点评 本题考查基因工程、免疫系统等相关知识，要求考生熟记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，意在考查考生的识记能力和应用能力，属于容易题．但是掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．