Question

18．转基因抗虫棉是人们较早应用基因重组技术的推广项目，目前转基因技术有了新的改进．如图所示．请根据所学知识回答下列问题：
（1）启动子的作用是与RNA聚合酶进行识别和结合，从而驱动基因的转录过程．目的基因与载体结合主要依靠二者含有相同的黏性末端．若限制酶切出了平末端，要选用T₄DNA连接酶进行连接．图中构建重组质粒选择的限制酶是EcoRⅠ和BamHⅠ．
（2）一般试管苗的形成．先诱导生成丛芽（填“丛芽”或“根”）．原因是进行光合作用合成有机物，利于生长．
（3）将目的基因导入植物受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法等．

Answer 1

分析 1、分析图解：图中SalⅠ限制酶的切割位点存在于目的基因的中间位置，若使用该限制酶切割目的基因会导致目的基因失活，因此应选择EcoRⅠ、BamHⅠ两种酶切割目的基因和质粒．
2、两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶）的比较：
①相同点：都缝合磷酸二酯键．
②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T₄DNA连接酶来源于T₄噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低．

解答 解：（1）启动子是RNA聚合酶进行识别和结合的位点，从而驱动基因的转录过程．目的基因与载体结合主要依靠二者含有相同的黏性末端．若限制酶切出了平末端，要选用T₄DNA连接酶进行连接．图中SalⅠ限制酶的切割位点存在于目的基因的中间位置，若使用该限制酶切割目的基因会导致目的基因失活，因此应选择EcoRⅠ、BamHⅠ构建重组质粒．
（2）一般试管苗形成后，可进行光合作用合成有机物，利于生长，因此先诱导生成丛芽．
（3）将目的基因导入植物受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法等．
故答案为：
（l）RNA聚合酶     黏性末端    T₄DNA连接酶     EcoRⅠ和BamHⅠ
（2）丛芽         进行光合作用合成有机物，利于生长
（3）农杆菌转化法       基因枪法      花粉管通道法

点评 本题结合图解，考查基因工程、细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，识记目的基因导入受体细胞的方法，再结合所学的知识准确答题．