Question

6．重组人血小板生成素（rhTPO）是一种新发现的造血生长因子，如图为通过乳腺生物发生器产生rhTPO的相关过程．

（1）在获取目的基因时（填“能”或“不能”）用SmaI，原因是不能，SmaⅠ的酶切位点位于目的基因中间，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因，重组质粒中的标记基因是抗卡那霉素基因，标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，以便筛选．
（2）通常采用显微注射技术将重组质粒导入受精卵，图中所示的过程与胚胎工程相关的有体外受精、早期胚胎培养、
胚胎移植（至少写出两个）．
（3）采用SRY-PCR方法对早期胚胎进行性别鉴定，样本细胞取自滋养层，以Y染色体中含有的特异性SRY基因为探针，通过DNA分子杂交方法进行胚胎的性别鉴定．

Answer 1

分析 分析图解：图中目的基因上存在三个限制酶切割位点，由于SmaⅠ的酶切位点位于目的基因中间，利用该限制酶会破坏目的基因，因此应选用HindⅢ和XhoⅠ两种限制酶切割目的基因，而利用这两种限制酶切割质粒会破坏质粒上的抗四环素基因，则质粒上应选用抗卡那霉素基因作为标记基因．

解答 解：（1）分析图解可知，图中目的基因上存在三个限制酶切割位点，由于SmaⅠ的酶切位点位于目的基因中间，利用该限制酶会破坏目的基因，因此应选用HindⅢ和XhoⅠ两种限制酶切割目的基因，而利用这两种限制酶切割质粒会破坏质粒上的抗四环素基因，则质粒上应选用抗卡那霉素基因作为标记基因．标记基因用于鉴别受体细胞中是否含有目的基因，以便筛选．
（2）动物细胞基因工程中，通常采用显微注射技术将重组质粒导入受精卵；图中受精卵的获得首先需要进行体外受精，再通过早期胚胎培养获得桑椹胚或囊胚，最后再利用胚胎移植技术．
（3）采用SRY-PCR方法对早期胚胎进行性别鉴定，样本细胞取自滋养层，以Y染色体中含有的特异性SRY基因为探针，通过DNA分子杂交方法进行胚胎的性别鉴定．
故答案为：
（1）不能      SmaⅠ的酶切位点位于目的基因中间，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因     抗卡那霉素基因     鉴别受体细胞中是否含有目的基因，以便筛选．
（2）显微注射   体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植
（3）滋养层   DNA分子杂交

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够识记基因工程的原理和方法步骤，能够根据图中限制酶的信息确定选择合适的限制酶，同时掌握动物基因工程中采用的胚胎工程技术．