Question

10．我国科学家建立了小鼠哺乳动物单倍体胚胎干细胞系，为基因操作找到了新的动物模型，从而解决了二倍体哺乳动物体细胞不易进行基因操作和筛选，而生殖细胞已高度分化，不能在体外扩增培养的困难．操作过程如图所示，请据图回答：

（1）图中切割目的基因和载体所用的酶是EcoRI和BamHI，基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，终止子的作用是使转录在所需要的地方停止下来．
（2）单倍体胚胎干细胞取自囊胚的内细胞团是，④过程采用的技术手段细胞融合，由此可见，单倍体胚胎干细胞能够代替精子，使卵细胞成功“受精”，支撑小鼠胚胎的全程发育．
（3）早期胚胎能够在受体内存活的主要生理学基础是不发生免疫排斥．
（4）和生殖细胞相比，单倍体胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不分化．

Answer 1

分析 分析题图：①是获得小鼠的孤雄单倍体胚胎的过程；②是获取胚胎干细胞；③是将重组质粒导入受体细胞中，不同的受体细胞采用的导入方法不同，如受体细胞是动物细胞，常用显微注射法；④是诱导细胞融合过程，⑤是早期胚胎培养过程，⑥是胚胎移植过程．

解答 解：（1）含有目的基因的外源DNA分子中含有三种限制酶（EcoRI/SmaI/BamHI）的切割位点，但SmaI的切割位点在目的基因上，使用该酶切割会破坏目的基因，因此应选择EcoRI和BamHI进行切割，再用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；终止子的作用是使转录在所需要的地方停止下来．
（2）内细胞团能发育成胎儿的各种组织，滋养层将发育成胎膜和胎盘，因此单倍体胚胎干细胞取自囊胚的内细胞团．④过程中将胚胎干细胞和卵母细胞融合需要采用细胞融合技术．
（3）早期胚胎能够在受体内存活的主要生理学基础是受体子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥．
（4）和生殖细胞相比，单倍体胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不分化，而生殖细胞已高度分化，不能在体外扩增培养．
故答案为：
（1）EcoR I和BamH I     基因表达载体的构建    使转录在所需要的地方停止下来
（2）内细胞团   细胞融合   
（3）不发生免疫排斥 
（4）增殖而不分化

点评 本题结合图解，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记细胞工程和胚胎工程涉及的相关技术，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．