Question

近十年来，动物细胞工程发展出一系列的技术，运用所学知识回答下列问题．
（1）动物细胞融合、生产单克隆抗体等技术的基础是

 

．
（2）动物细胞培养的原理是

 

，动物细胞培养的培养基中需要添加

 

作为特殊的营养物质．
（3）已知IgG抗体能消除狂犬病病毒．特异性IgG抗体获取也可用单克隆抗体制备法，如图是单克隆抗体的制备过程示意图，请回答下列问题．

①从小鼠的脾脏中取得B淋巴细胞之前，给小鼠注射的物质A是

 

，目的是为了

 

．
②动物细胞融合除了采用植物原生质体融合常用的诱导方法外，还可以采用的方法是

 

．
③根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于

 

培养基．
④B过程的目的是

 

．
⑤单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是

 

．
⑥在杂交瘤细胞体外培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的

 

．此时，瓶壁上形成细胞层数是

 

．要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是

 

．
⑦在动物细胞培养过程中，随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现细胞衰老甚至死亡降低，但极少数细胞可以连续增殖，其根本原因是

 

，而且，该种细胞不再具有贴壁能力，原因是细胞表面的

 

减少．

Answer 1

考点：单克隆抗体的制备过程

专题：

分析：1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体．
2、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
3、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．

解答： 解：（1）动物细胞培养是动物细胞融合、生产单克隆抗体等技术的基础．
（2）动物细胞培养的原理是细胞分裂（细胞增殖），动物细胞培养的培养基中需要添加动物血清作为特殊的营养物质．
（3）①从小鼠的脾脏中取得B淋巴细胞之前，给小鼠注射的物质A是狂犬病病毒，目的是为了获得能够产生单一抗体的B淋巴细胞．
②动物细胞融合除了采用植物原生质体融合常用的诱导方法外，还可以采用的方法是灭活的病毒．
③图中HAT培养基可筛选出杂交瘤细胞，属于选择培养基．
④B是第二次筛选过程，其目的是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞．
⑤单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备．
⑥接细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖．由于接触抑制，动物细胞培养时，瓶壁上只能形成的单层细胞．可以用胰蛋白酶处理使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来．
⑦在动物细胞培养过程中，随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现细胞衰老甚至死亡降低，但极少数细胞可以连续增殖，其根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变，而且，由于该种细胞表面的糖蛋白减少，细胞不再具有贴壁能力．
故答案为：
（1）动物细胞培养
（2）细胞分裂（细胞增殖）       动物血清
（3）①狂犬病病毒     获得能够产生单一抗体的B淋巴细胞
②灭活的病毒
③选择
④筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞
⑤特异性强，灵敏度高，可大量制备
⑥接触抑制         单层（或一层）      胰蛋白酶
⑦原癌基因和抑癌基因发生基因突变        糖蛋白

点评：本题考查动物细胞培养和单克隆抗体的制备等知识，要求考生识记动物细胞培养的原理、过程及意义；识记单克隆抗体的制备过程，难度不大，只要平时多加训练即可准确答题．