Question

15．某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动．具体步骤如下：
材料处理：称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份，每份10g．剪碎后分成两组，一组置于20℃，另一组置于-20℃条件下保存24h．
DNA粗提取：
第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL 研磨液，充分研磨．用纱布过滤，取滤液备用．
第二步：将滤液放在60〜75℃的恒温水浴箱中保温10〜15min，然后将溶液过滤．
第三步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上．
第四步：取6支试管，分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物．
DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液颜色的深浅，结果如表：

材料保存温度	菜花	辣椒
20℃	++	+	+++
-20℃	+++	++	++++

注：“+“越多表示蓝色越深．
分析上述实验过程，回答下列问题：
（1）该探究性实验课题的名称是探究不同材料和不同保存温度对DNA 提取量的影响．
（2）第二步操作目的是去除滤液中的杂质．
（3）第三步中“缓缓地“搅拌，这是为了减少DNA断裂．
（4）根据实验结果，得出结论并分析．
①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多．结论2：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的DNA 量最多．
②针对结论1，请提出合理的解释：低温抑制了相关酶的活性，DNA 降解速度慢．
（5）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小．为了进一歩提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第四步的基础上继续操作的步骤是：将第四步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液．然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出．

Answer 1

分析 分析表格：表中有两个变量，即不同材料和不同保存温度．与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多；等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多．

解答 解：（1）由表格可知该实验的变量是不同材料和不同保存温度，因此该探究性实验课题名称是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响．
（2）第二步操作目的是去除滤液中的杂质．
（3）第二步中”缓缓地”搅拌，为了减少DNA断裂．
（4）①根据实验结果可知：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多．
②因为低温抑制了相关酶的活性，使DNA降解速度减慢，所以与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多．
（5）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小，所以为了进一步提高DNA纯度，可将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混和，静置一段时问，吸取上清液．然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出．
故答案为：
（1）探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响
（2）去除滤液中的杂质
（3）DNA断裂
（4）①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的DNA 量最多②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢
（5）将第四步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液

点评 本题考查DNA粗提取和鉴定及相关探究实验，首先要求考生识记DNA粗提取和鉴定的实验原理和操作步骤等知识；其次要求考生能根据表格，判断该实验的自变量及课题名称，同时根据表中信息，得出正确的结论，并能在此基础上对实验进行完善．