在生物技术实践过程中.往往需要注意某些实验步骤的操作.请将下列实验中的注意事项填写完整:(1)在腐乳的制作时.用来腌制腐乳的玻璃瓶.洗刷干净后要用消毒,在血红蛋白的提取和分离中.若红细胞的洗涤次数过少.将无法除去．(2)在提取植物细胞的DNA时.需要先用洗涤剂溶解．在花药离体培养中剥离花药时.要彻底去除 .因为与其相连的花药不� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

在生物技术实践过程中，往往需要注意某些实验步骤的操作，请将下列实验中的注意事项填写完整：
（1）在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用

消毒；在血红蛋白的提取和分离中，若红细胞的洗涤次数过少，将无法除去

．
（2）在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解

．在花药离体培养中剥离花药时，要彻底去除

，因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成．
（3）在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，往往需要稀释土壤溶液，为了避免杂菌污染，此过程每一步都要在

旁操作．在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用

的方法．胡萝卜素提取的萃取过程应采用

加热，因为有机溶剂都是易燃物．
（4）为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行

．

考点：制作腐乳的科学原理及影响腐乳品质的条件,以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量,DNA的粗提取和鉴定

专题：

分析：1、杂菌的污染会对培养结果造成影响，防止杂菌入侵，获得纯净的培养物是研究和应用微生物的前提．实验过程中，用沸水对玻璃瓶进行消毒，用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌．
2、蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂（细胞膜和核膜的破裂），从而释放出DNA．

解答： 解：（1）腐乳的制作起主要作用的是毛霉，为了防止杂菌的污染，腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒．血液中含量血浆、红细胞的等成分，血浆中的血浆蛋白存在会影响后期血红蛋白的提取，故应多次洗涤，除去血浆蛋白等杂蛋白．
（2）在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解细胞膜，动物细胞则用蒸馏水胀破．在花药离体培养中剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织，同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药，不利于愈伤组织或胚状体的形成．
（3）稀释土壤溶液的实验操作中，为了避免周围环境中微生物的污染，应在火焰旁操作，因为酒精灯火焰一定范围内，由于温度比较高所以没有杂菌．在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用小火间断加热的方法．如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊．胡萝卜素提取的萃取过程应避免明火加热，采用水浴加热，因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸．
（4）PCR是进行DNA的扩增，为避免外源DNA等的污染，PCR实验中使用的相关器具如微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等应提前高压蒸汽灭菌．
故答案为：
（1）沸水血浆蛋白
（2）细胞膜花丝
（3）火焰小火间断加热水浴
（4）高压灭菌

点评：本题考查腐乳的制作、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数、DNA的粗提取、月季的花药培养、多聚酶链式反应扩增DNA片段、酵母细胞的固定化、血红蛋白的提取和分离、胡萝卜素的提取，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．