Question

11．科学家培育转乳糖分解酶基因奶牛的过程如图所示．请回答下列问题：

（1）图中细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有血清．在进行细胞原代培养时会出现细胞贴壁生长和细胞接触抑制现象．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素．
（2）图中将乳糖分解酶基因导入胚胎呈纤维细胞中，最常用的方法是显微注射法．
（3）图中的核移植操作需要将经过细胞培养获得的供体细胞的细胞核注入去核的卵母细胞中，去掉卵母细胞细胞核的目的是保证克隆动物的核遗传物质全部来自供体细胞的细胞核，而所用的供体细胞一般都选用传代培养10代以内的细胞，原因是传代培养10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型．
（4）重组细胞2在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛体内会生出与图中的黑白花奶牛性状并不完全相同的犊牛，原因可能有生物的性状受细胞核和细胞质中遗传物质共同控制、生物的性状还受环境因素的影响、胚胎成纤维细胞的遗传物质有近一半来自配种的公牛等．（至少答出两点）
（5）单克隆抗体的制备也需要构建重组细胞，该重组细胞是将骨髓瘤细胞和免疫过的B细胞融合而成的．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
3、将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体．用核移植的方法得到的动物称为克隆动物．

解答 解：（1）在动物细胞培养的合成培养基中，通常需加入动物血清等天然成分．在进行细胞原代培养时会出现细胞贴壁生长和细胞接触抑制现象．向培养液中加入适量的抗生素，可以防止细胞培养过程中细菌的污染．
（2）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法．
（3）核移植过程中，去掉卵母细胞细胞核的目的是保证克隆动物的核遗传物质全部来自供体细胞的细胞核．原代培养10代以内的细胞能保持正常的二倍核型，因此所用的供体细胞一般都选用原代培养10代以内的细胞．
（4）由于生物的性状受细胞核和细胞质中遗传物质共同控制、生物的性状还受环境因素的影响、胚胎成纤维细胞的遗传物质有近一半来自配种的公牛等，因此重组细胞2在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛体内会生出与图中的黑白花奶牛性状并不完全相同的犊牛．
（5）单克隆抗体的制备过程中，将骨髓瘤细胞和免疫过的B细胞融合构建重组细胞（杂交瘤细胞）．
故答案为：
（1）血清    细胞贴壁生长   抗生素
（2）显微注射法
（3）供体细胞的细胞核    二倍体核型
（4）生物的性状受细胞核和细胞质中遗传物质共同控制、生物的性状还受环境因素的影响、胚胎成纤维细胞的遗传物质有近一半来自配种的公牛等（5）骨髓瘤细胞和免疫过的B细胞

点评 本题考查动物细胞培养、核移植、单克隆抗体的制备的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程、条件及相关应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．