Question

4．在利用大肠杆菌生产人胰岛素的研究中，获取胰岛素基因的方法之一是逆转录法（反转录法）．下列有关这一过程的叙述中，正确的是（　　）

• A． 需要逆转录酶、RNA聚合酶、DNA连接酶
• B． 人胰岛素mRNA只能从胰岛B细胞中获得
• C． 这一过程是在细胞外完成，需要细胞所需的全部营养物质、适宜温度等条件
• D． 逆转录获得的“胰岛素基因”结构不完整，缺少启动子、终止密码子等结构

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、采用逆转录法获取胰岛素基因的过程中，需要逆转录酶、DNA聚合酶，不需要RNA聚合酶和DNA连接酶，A错误；
B、由于胰岛素基因只能在胰岛B细胞中表达，因此人胰岛素mRNA只能从胰岛B细胞中获得，B正确；
C、这一过程是在细胞外完成，需要适宜的条件，但不需要营养物质，C错误；
D、逆转录获得的“胰岛素基因”结构不完整，缺少启动子、终止子等结构，终止密码子位于mRNA上，D错误．
故选：B．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤等，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．