Question

9．2016年5月13日，美国国家卫生院科学家发表报告，他们在艾滋病病毒上发现一种由8个氨基酸组成的融合肽，它是病毒入侵细胞的关键性物质．这一发现为艾滋病的预防和治疗开辟了一条新途径．
（1）欲将融合肽设计为疫苗进行免疫预防，可能需要改造其部分结构．
 ①一般流程是：预期新型融合肽的功能→设计新型融合肽结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列．然后用DNA合成仪（答一种仪器）合成出目的基因．要获得大量的目的基因，需要用PCR扩增．该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．
 ②欲用牛乳腺生物反应器大量生产新型融合肽，在构建基因表达载体时，需要加入牛乳腺蛋白基因启动子，通常选用受精卵作为受体细胞．
（2）欲大量生产融合肽抗体用于免疫治疗，可将融合肽反复多次注入小鼠体内，从小鼠脾脏提取B（B淋巴）细胞，将其与小鼠骨髓瘤细胞融合，并在特定的培养基上筛选出杂交瘤细胞，再通过（多次）克隆化培养和（专一）抗体（阳性）检测，筛选出能产生融合肽抗体的杂交瘤细胞，在小鼠腹水或体外扩大培养，获得大量融合肽抗体．

Answer 1

分析 1、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行．
2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞．利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞②筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞．最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体．

解答 解：（1）①可利用蛋白质工程的基本途径是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核甘酸序列．然后用DNA合成仪合成出目的基因．要获得大量的目的基因，需要用PCR扩增．该技术的前提是要有 一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．
②在构建基因表达载体时，需要加入牛乳腺蛋白基因启动子，受精卵作为最理想的受体细胞．
（2）单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞．利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，并在特定的培养基上筛选出杂交瘤细胞，再通过（多次）克隆化培养和（专一）抗体（阳性）检测，筛选出能产生融合肽抗体的杂交瘤细胞．
故答案为：
（1）①应有氨基酸序列    DNA合成仪      PCR       一段已知目的基因的核苷酸 ②牛乳腺蛋白基因         受精卵
（2）B（B淋巴）     （多次）克隆化培养和（专一）抗体（阳性）检测

点评 本题考查蛋白质工程、单克隆抗体的制备的有关知识，要求考生识记蛋白质工程的基本途径和单克隆抗体制备的过程，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．