Question

11．近年兴起CRISPK-Cas技术被用于预防和治疗多种人类遗传病．该技术的核心是一段具有特定序列的RNA（CRISPR RNA）及与该RNA结合在一起的Cas蛋白构成．回答下列问题：
（1）治疗人类遗传病最有效的手段是基因治疗，通常又分为体内基因治疗和体外基因治疗两种类型．
（2）用该技术治疗遗传病的基本过程是：根据遗传病致病基因的序列设计一段RNA（即CRISPR RNA），将该RMA与Cas蛋白结合形成复体，并导入患者细胞中，导入方法与外源基因导入人体细胞相似，可采用显微注射法法；进入细胞后的复合体RNA的指引下按照碱基互补配对原则准确的结合在致病基因部位，而Cas蛋白则对致病基因进行切割．由此可见，Cas蛋白应该是一种限制性核酸内切酶．
（3）对于患遗传病的个体来说，不可能对每个细胞都注射该复合体，因此，研究人员选用动物病毒为运载体，从而使复合体在运载体的协助下能够大量主动进入人体细胞，但在使用前需要对运载体进行灭毒（或（减毒）处理，以保证其安全性．该运载体进入人体细胞的方式通常是胞吞．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
2、基因治疗（治疗遗传病最有效的手段）把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的．
（1）体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后再体外完成转移，再筛选成功转移的细胞增植培养，最后重新输入患者体内，如腺苷酸脱氨酶基因的转移．
（2）体内基因治疗：用基因工程的方法直接向人体组织细胞中转移基因的方法．

解答 解：（1）基因治疗分为体内基因治疗和体外基因治疗两种类型．
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；进入细胞后的复合体RNA的指引下按照碱基互补配对原则准确的结合在致病基因部位；Cas蛋白可对致病基因进行切割．由此可见，Cas蛋白应该是一种限制性核酸内切酶．
（3）利用动物病毒侵染动物细胞的特性，可选用动物病毒为运载体，从而使复合体在运载体的协助下能够大量主动进入人体细胞，但在使用前需要对运载体进行灭毒（或（减毒）处理，以保证其安全性．该运载体进入人体细胞的方式通常是胞吞．
故答案为：
（1）体内基因治疗   体外基因治疗
（2）显微注射法      碱基互补配对    限制性核酸内切
（3）动物病毒        灭毒（或（减毒）   胞吞

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，了解基因工程技术的相关应用，能结合所学的知识准确答题．