Question

15．图1是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程．图2中质粒是基因工程中常用的质粒pIJ702，其中tsr为硫链丝菌素抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、Pst I、SacⅠ、SphⅠ在pⅠJ702 上分别只有一处识别序列．

表1

	pIJ702	pZHZ8
BglⅡ	5.7kb	6.7kb
ClaⅠ	5.7kb	2.2kb，4.5kb
Pst I	5.7kb	1.6kb，5.1kb

（1）图1中应用到的生物工程技术有核移植技术、转基因技术、胚胎移植技术、动物细胞培养技术等．c分子称为达载体（重组DNA分子或重组质粒），其上的生长激素基因表达产物的受体分布在丁鼠的全身细胞的细胞膜上．
（2）若大鼠甲和大鼠乙体内X染色体上均带有某种致病基因，则培育出的大鼠丙和大鼠丁携带致病基因的是（不考虑基因突变）大鼠丙携带，丁不携带．
（3）以SacⅠ和SphⅠ同时切割大鼠生长激素基因和质粒PIJ702，获取的目的基因去置换PIJ702上0.4kb的片段，构成重组质粒pZHZ8．上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中．由此判断目的基因的片段长度为1.4kb．参照表1数据，如果用PstⅠ和Cla l同时酶切重组质粒pZHZ8，则两种酶可将pZHZ8切成4个片段．
（4）重组质粒pZHZ8上的标记基因是tsr基因（硫链丝菌素抗性基因），在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰黑色的菌落．

Answer 1

分析 分析图1：图1是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程．Ⅰ采用了核移植技术；Ⅱ采用了基因工程技术，其中①表示基因表达载体的构建过程，然后导入小鼠受精卵．

解答 解：（1）图1中，技术Ⅰ采用了核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技术，技术Ⅱ采用了基因工程、动物细胞培养和胚胎移植等技术．因此图1中应用到的生物工程技术有核移植技术、转基因技术、胚胎移植技术、动物细胞培养技术等．c是构建好的基因表达载体（重组DNA分子或重组质粒）；生长激素基因表达产物为生长激素，其受体分布在丁鼠的全身细胞的细胞膜上．
（2）大鼠丙的细胞核遗传物质都来自大鼠甲，因此且携带致病基因；大鼠丁只导入了大鼠乙的一个基因，因此不携带致病基因．
（3）质粒PIJ702的长度为5.7kb，而重组质粒pZHZ8的长度为6.7kb，又已知构建基因表达载体时，目的基因置换了PIJ702上0.4kb的片段，由此判断目的基因的片段长度为6.7-5.7+0.4=1.4kb．用ClaⅠ切割质粒PIJ702时只产生一种长度的DNA片段，但用该酶切割重组质粒pZHZ8时能产生两种长度的DNA片段，这说明目的基因中含有ClaⅠ的切割位点，同理目的基因中也含有PstⅠ的切割位点，即重组质粒pZHZ8中含有2个PstⅠ酶切位点，也含有2个Cla l酶切位点．因此，用这两种酶同时酶切重组质粒pZHZ8时，可将pZHZ8切成4个片段．
（4）构建基因表达载体时，破坏了mel（黑色素合成基因），但没有破坏tsr（硫链丝菌素抗性基因），因此重组质粒pZHZ8上的标记基因是tsr基因（硫链丝菌素抗性基因）；由于mel（黑色素合成基因）被破坏，含有重组质粒的受体细胞不能表达产生黑色素，因此重组质粒中的在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰黑色的菌落．
故答案为：
（1）核移植技术、转基因技术、胚胎移植技术、动物细菌培养技术等         达载体（重组DNA分子或重组质粒）        细胞膜上
（2）大鼠丙携带，丁不携带
（3）1.4       4
（4）tsr基因（硫链丝菌素抗性基因）      黑

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能正确分析题图，再运用图中信息准确答题，属于考纲理解和应用层次的考查，有一定难度．