如图所示为A.B.C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图．图1中Ap为氨苄青霉素抗性基因.Tc为四环素抗性基因.lacZ为蓝色显色基因．图中EcoRⅠ.PvuⅠ为两种限制酶.质粒上限制酶括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离．回答下列问题．(1)图中三种质粒中不能作为目的基因运载体的是质粒A.质粒C.理由是缺少标记基因.复制原点会� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

8．如图所示为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图．图1中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因．图中EcoRⅠ、PvuⅠ为两种限制酶，质粒上限制酶括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离．回答下列问题．

（1）图中三种质粒中不能作为目的基因运载体的是质粒A、质粒C，理由是（质粒A）缺少标记基因、（质粒C）复制原点会被限制酶切割．
（2）在基因工程的操作过程中，需要检查目的基因是否重组到质粒中，应使用EcoRⅠ酶切重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测．若电泳图谱中出现长度为1.1kb和5.6kb，或者3.1kb和3.6kb的片段，则可判断该重组质粒已与目的基因重组成功．
（3）为研究目的基因D的功能，研究人员用图2所示的引物组合分别扩增D基因的D₁片段、D₃片段（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）．
注：引物Ⅱ、Ⅲ上的x，y片段分别与N基因两端互补配对
①用引物Ⅰ、Ⅱ组合扩增后，得到的绝大部分DNA片段是图3中的d．
②将大量N基因片段与扩增得到的D₁片段、D₃片段置于PCR反应体系中进行扩增，得到的绝大多数扩增产物是D₁-N-D₃（填“D₁-N”或“D₁-D₃一N”或“D₃-N”或“D₁-N-D₃”）．

分析分析题图：如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因．EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离．

解答解：（1）图中质粒A缺少标记基因；质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制．因此，能作为目的基因运载体最理想的质粒是B．
（2）分析图解可知，在目的基因上存在EcoRⅠ酶的切割位点，因此在基因工程的操作过程中，需要检查目的基因是否重组到质粒中，应使用该酶切重组质粒．目的基因和质粒B形成的重组质粒长度为2.7-0.1+（4.0-1.0）=5.6kb（质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的大片段）、0.1+1.0=1.1kb（质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的小片段）或2.7-0.1+1.0=3.6（质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的小片段）、0.1+3.0=3.6（质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的大片段）．
（3）①根据题图分析，用引物Ⅰ、Ⅱ组合扩增扩增的是D1片段，以引物Ⅱ所在的单链为模板在引物Ⅰ的作用下合成DNA时，引物Ⅱ上的X片段也被作为模板合成子链，因此得到的绝大部分DNA片段是图3中的d．
②由于引物Ⅱ、Ⅲ上的x、y片段都能与N基因两条链上的碱基进行互补配对，因此将大量N基因片段与扩增得到的D₁片段、D₃片段置于PCR反应体系中进行扩增，得到的绝大多数扩增产物是D₁-N-D₃，A₂基因被敲除．
故答案为：
（1）质粒A、质粒C　（质粒A）缺少标记基因（质粒C）复制原点会被限制酶切割
（2）EcoRⅠ3.1　3.6
（3）①d　②D₁-N-D₃

点评本题结合题图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题，属于考纲理解和应用层次的考查，有一定难度．

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Ⅱ．能量在雪滴兰所在生态系统中的变化形式如图2所示．请根据所学知识回答下列问题：
（1）②过程主要通过各营养级生物的呼吸作用实现，此生理过程释放的能量除以热能的形式散失外，其余少部分储存在ATP中．此物质合成过程往往与细胞内的放能（填“吸能”或“放能”）反应相联系．
（2）以上过程发生于白天的是①②，发生于夜间的是②．（填写图中序号）

20．如图表示细胞内某些有机物的元素组成和功能关系，其中A、B代表元素，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ是生物大分子，图中X、Y、Z、P分别为构成生物大分子的基本单位．请回答下列问题：

（1）图中X被形容为“生命的燃料”，它是葡萄糖，Ⅰ在肝细胞中是（肝）糖原．
（2）图中Y是脱氧核糖核苷酸，其彻底水解产物是脱氧核糖、磷酸、含氮碱基．使用甲基绿、吡罗红混合染液染色，可使Ⅲ呈现红色．
（3）图中P的结构通式为

；Ⅳ的种类不同是因为（从P分析）氨基酸（P）种类、数目、排列顺序不同．
（4）细胞膜上的受体的主要成分是图中的Ⅰ和Ⅳ（填标号），噬菌体的组成成分是图中的Ⅱ和Ⅳ（填标号）

17．下列关于实验材料选择或实验方法的描述，错误的是（　　）

选项	实验内容	实验材料或方法
A	蛋白质的鉴定	可选用新鲜的或煮沸过的豆浆作为材料
B	观察植物细胞质壁分离和复原	可选用黑藻叶片作为材料
C	探究植物生长素类似物对扦插枝条生根的影响	将插条浸泡在系列浓度梯度的生长素类似物溶液中让其生根
D	利用样方法调查种群密度	采用随机取样

4．图1表示物质运输的不同方式示意图（图中■、▲、□、○代表跨膜的离子或小分子）；图2表示肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的过程．回答下列问题．

（1）图1中“P”侧属于细胞的外侧，判断依据是糖蛋白位于膜外侧．
（2）图1中b、c方式运输的特点有逆浓度梯度、需要载体、消耗能量；物质X的运输方式为协助扩散．
（3）结合图1和图2分析，图1中a方式，Y转运所需的能量来源于①（填序号）．
①X离子运输中的梯度动力　
②ATP直接提供能量
③光能驱动　　
④细胞内物质合成时释放的能量
（4）据图2推测，限制肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的两个主要因素是细胞膜上载体蛋白的数量、Na⁺的吸收量（膜内外Na⁺浓度梯度）．

在如图所示的细胞中的细胞质基质内含有的多糖和核酸主要是（）

A．糖原和RNA B．糖原和DNA

C．淀粉和RNA D．淀粉和DNA

18．在细胞的生命历程中，下列说法不正确的是（　　）

	A．	精原细胞增殖具有周期性，对生物遗传有重要意义
	B．	胰腺细胞和心肌细胞中均含有指导合成淀粉酶的mRNA
	C．	细胞衰老时，细胞内多种酶的活性降低，细胞核体积增大
	D．	癌症的发生并不是单-基因突变的结果，而是一种累积效应

15．如图是制备分泌抗X抗体过程，根据图解回答问题：

（1）给小鼠注射抗原的目的是产生相应的（效应）B细胞．
（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有无限增殖和分泌抗体的特性．
（3）由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了动物细胞融合和动物细胞培养的动物细胞工程技术手段，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是灭活病毒．
（4）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有动物血清．
（5）图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是筛选出杂交瘤细胞，步骤⑤⑥的目的是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞．
（6）单克隆抗体的特点是特异性强灵敏度高．
（7）请根据以下信息，设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中筛选出杂交瘤细胞．已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断．人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞．方法：培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞．原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖．

生物体进行生命活动所需的直接能源、主要能源和最终能源依次是（）

A．太阳能、糖类、ATP B．ATP、糖类、脂肪

C．ATP、脂肪、太阳能 D．ATP、糖类、太阳能

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