Question

13．某家庭拟自制酵母菌菌种酿制葡萄酒，请帮助完成酿制计划，并分析相关问题：
（1）制菌种
步骤1：挑选白色斑点较多的葡萄，取皮加入培养液中，获得提取液．
分析：葡萄上的白色斑点很可能是酵母菌菌落．
步骤2：将菌种用培养液扩大培养．
培养时一般需振荡，振荡的目的是：增加培养液中溶氧量，并有利于酵母菌与营养物质接触．
分析：若要对培养液中的酵母菌采用血球计数板计数，方法是：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，在显微镜下计数；也可采用图中稀释涂布平板法的方法进行计数．前者统计的是活菌加死菌，后者统计的是活菌．（填：活菌、死菌、活菌加死菌）

（2）挑选葡萄冲洗并晾干．
（3）破碎装瓶：不要将瓶装满，要留约$\frac{1}{3}$的空间．
（4）接种并加糖发酵：所加糖量不要太多，可按照10比1的比例加糖．
分析：若所加糖量过多，会导致酵母菌失水死亡．
（5）过滤：约一星期后将发酵液用尼龙布反复过滤，充分去除渣滓．
（6）密封：过滤后的发酵液密封进行后发酵，此时不是靠酵母发酵，而是进行苹果酸乳酸发酵，约30天后启封．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，图甲所示的菌种纯化方法是稀释涂布平板法，图乙所示的菌种纯化方法是平板划线法．

解答 解：（1）葡萄皮上含有野生酵母菌，所以葡萄上的白色斑点很可能是酵母菌菌落．培养时一般要振荡，振荡的目的是增加培养液中溶氧量，并有利于酵母菌与营养物质接触．采用血球计数板对培养液中的酵母菌计数时，先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，在显微境下计数；也可采用图甲所示稀释涂布平板法．在相同条件下，采用上述两种方法对同一培养液进行计数时，在操作和计算均正确的前提下，发现前者计数结果明显偏大，可能的原因是前者统计的是活菌和死菌的数量，后者只能统计活菌的数量．
（3）将葡萄汁装人发酵瓶，要留要大约$\frac{1}{3}$的空间，目的是防止发酵液溢出．
（4）若所加糖量过多，导致培养液溶度过大，这可能会导致酵母菌失水过多死亡．
故答案为：
（1）酵母菌菌落      增加培养液中溶氧量，并有利于酵母菌与营养物质接触     盖玻片       稀释涂布平板法     活菌加死菌       活菌
（3）$\frac{1}{3}$      
（4）酵母菌失水死亡

点评 本题考查果酒和果醋的制作、微生物的分离和培养，要求考生识记果酒和果醋制作的原理、条件等知识；识记接种微生物常用的两种方法，掌握微生物计数的方法及注意事项，能结合所学的知识准确答题．