Question

5．幽门螺旋菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素．在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养．实验基本步骤如下：

请回答：
（1）在微生物培养的样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是④ （填序号）．
①酒精灯  ②培养皿  ③移液管  ④显微镜  ⑤涂布器
（2）在涂布平板时，取少量菌液滴加到培养基表面的原因是若涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量过多，则会导致菌体堆积，影响分离效果．
（3）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现红色环带．
（4）临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的尿素分解为NH₃和¹⁴CO₂．
（5）上述（3）中的指示剂出现对应的颜色是因为氨会使培养基的碱性增强，pH升高．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．．
2、由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．

解答 解：（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，需要使用酒精灯、培养皿、移液管、无菌水等，但不需要显微镜．
（2）若涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量过多，则会导致菌体堆积，影响分离效果，因此在涂布平板时，取少量菌液滴加到培养基表面．
（3、5）由于Hp含有脲酶，它能以尿素为氮源，因此配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂；若有Hp，尿素被分解产生氨，pH升高，指示剂变红，即菌落周围会出现红色环带．
（4）临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的尿素分解为NH₃和¹⁴CO₂．
故答案为：
（1）④
（2）若涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量过多，则会导致菌体堆积，影响分离效果
（3）尿素    酚红     红
（4）Hp能将¹⁴C标记的尿素分解为NH₃和¹⁴CO₂
（5）氨会使培养基的碱性增强，pH升高

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生掌握菌种分离与纯化的方法和步骤，微生物的实验室分离是选修一的重点内容，考生需重点掌握教材的基础知识点，注意归纳总结．