Question

5．以下是一种分离土壤中纤维素分解菌的培养基配方：纤维素粉5g、NaNO₃ 1g、Na₂HPO₄•7H₂O 1.2g、KH₂PO₄0.9g、MgSO₄．7H₂O0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g（蒸馏水定容到1000mL）．请回答：
（1）培养基的种类很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，该培养基中纤维素粉（或纤维素）是最主要的碳源，按培养基的功能划分属于选择培养基，培养基配制完成后，一般还要调节PH值，并对培养基进行灭菌处理．
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法 和稀释涂布平板法．
（3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用涂布平板法（或稀释涂布平板法）法接种到鉴别培养基上，假设某同学发现培养基上此种细菌数目过多连成一片，可能的原因是菌液浓度过高（或稀释倍数不够）．
（4）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是温度，PH值等无关变量保持相同且适宜．

Answer 1

分析 1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

3、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；该培养基中纤维素粉（或纤维素） 是最主要的碳源；该培养基以纤维素为唯一碳源，只有能分解纤维素的微生物才能生长，因此按培养基的功能划分属于选择培养基；培养基配制完成后，一般还要调节PH值，并对培养基进行灭菌处理．
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．因此，为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用涂布平板法（或稀释涂布平板法 ）法接种到鉴别培养基上；如果发现培养基上此种细菌数目过多连成一片，可能的原因是菌液浓度过高（或稀释倍数不够）．
（4）探究温度对纤维素酶活性的影响的实验中，自变量是温度，PH值等无关变量保持相同且适宜．
故答案为：
（1）氮源      纤维素粉（或纤维素）       选择         灭菌
（2）平板划线法     稀释涂布平板法
（3）刚果红      涂布平板法（或稀释涂布平板法 ）    菌液浓度过高（或稀释倍数不够）
（4）温度

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法，能结合所学的知识准确判断各选项．