Question

9．苏云金芽孢杆菌产生的Bt毒蛋白在害虫的消化道内能被降解成有毒的多肽，最终造成害虫死亡，因此Bt基因广泛用于培育转基因抗虫植物．
（1）培育转基因抗虫棉所需的目的基因来自苏云金芽孢杆菌的基因组，再通过PCR技术扩增．PCR反应中温度呈现周期性变化，其中加热到90～95℃的目的是DNA解链（变性、解旋、受热变性后解链为单链），然后冷却到55-60℃使引物与互补DNA链结合，继续加热到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下进行延伸（Taq酶从引物起始进行互补链的合成）．
（2）限制酶主要是从原核生物（或微生物）中获得，其特点是能够识别DNA分子某种特定的核苷酸序列，并在特定位点切割DNA．
（3）科研人员培育某品种转基因抗虫棉的过程中，发现植株并未表现抗虫性状．可能的原因是所转的基因未成功导入，导入的基因未能准确表达．
（4）在基因表达载体中，目的基因的首端和尾端必须含有启动子和终止子这样目的基因才能准确表达．

Answer 1

分析 1、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸

过程	说明
变性	当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链
复性	温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
延伸	72℃左右时，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新链由5'端向3'端延伸

解答 解：（1）根据题意可知，培育转基因抗虫棉所需的目的基因来自苏云金芽孢杆菌的基因组，再通过PCR技术扩增．PCR反应中温度呈现周期性变化，其中加热到90～95℃的目的是双链DNA解聚为单链，然后冷却到55-60℃使引物与互补DNA链结合，继续加热到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下进行延伸．
（2）限制酶主要是从原核生物（或微生物）中获得，其特点是能够识别DNA分子某种特定的核苷酸序列，并在特定位点切割DNA．
（3）科研人员培育某品种转基因抗虫棉的过程中，发现植株并未表现抗虫性状．可能的原因是所转的基因未成功导入，导入的基因未能准确表达．
（4）在基因表达载体中，目的基因的首端和尾端必须含有启动子和终止子，这样目的基因才能准确表达，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合位点，终止子终止基因的转录．
故答案为：
（1）苏云金芽孢杆菌DNA解链（变性、解旋、受热变性后解链为单链）  在DNA聚合酶作用下进行延伸（Taq酶从引物起始进行互补链的合成）
（2）原核生物（或微生物）    特定的核苷酸序列
（3）所转的基因未成功导入，导入的基因未能准确表达
（4）启动子和终止子

点评 本题考查基因工程和PCR技术等知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤及应用，掌握各操作步骤中的方法及相关事项；识记PCR技术的概念、原理及条件，能结合所学的知识答题，属于考纲识记层次的考查．