Question

9．土壤中的细菌数量多、分布广，包括自养细菌和异养细菌．自养细菌能直接利用光能或无机物氧化时所释放的化学能同化CO₂合成有机物（例如硝化细菌），异养细菌从有机物中获得能源和碳源（例如纤维素分解菌），人类根据需要从土壤中分离提纯各种细菌．回答下列相关问题：
（1）培养细菌的培养基除了含有碳源外，还必须含有的基本成分是氮源、水、无机盐、维生素．
（2）对培养基灭菌的方法是高压蒸汽灭菌或高温高压灭菌．
（3）若要筛选硝化细菌，培养基中不应该加入碳源，从功能上分，该培养基属于选择培养基．
（4）若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入刚果红，观察培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养．培养时需要振荡，其主要目的是供氧．
（5）纯化菌种时，为了得到单菌落，常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．
（6）细菌计数，根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的数目往往比实际数目低，原因是两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落．

Answer 1

分析 （1）培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．分为液体培养基和固体培养基．
（2）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法．
（3）培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法．
（4）选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同．有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐．

解答 解：（1）不同的培养基都含有基本成分，水、无机盐，碳源、氮源．
（2）对培养基灭菌的方法是高压蒸汽灭菌．
（3）硝化细菌能够进行化能合成作用合成有机物，因此若要筛选硝化细菌，培养基中不应该加入碳源，从功能上分，该培养基属于选择培养基．
（4）若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入刚果红，观察培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养．培养时需要振荡，其主要目的是供氧．
（5）纯化菌种时，为了得到单菌落，常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．
（6）细菌计数，由于两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的数目往往比实际数目低．
故答案为：
（1）氮源、水、无机盐、维生素
（2）高压蒸汽灭菌或高温高压灭菌        
（3）碳源       选择
（4）刚果红     供氧  
（5）稀释涂布平板法     平板划线法
（6）两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

点评 本题主要考查目的菌株的筛选、接种方法和培养基的配制注意事项等，意在强化学生对相关实验操作的识记、理解与运用．