Question

【选做部分生物--选修3现代生物科技专题】
人外周血单核细胞能合成白介素2 （IL-2），该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解．研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL-2生理功能、且不易降解的1L-2-HSA融合蛋白．其技术流程如下图．请答：
（1）培养人外周血单核细胞时，需要将温度控制在

 

℃，此外还需要通入

 

（气体）；图中②表示

 

过程．
（2）构建基因表达载体时能够催化磷酸，二酯键断裂的工具酶是

 

：构建好的基因表达载体必须具备启动子、目的基因、

 

等结构，才能在宿主细胞内表达．
（3）基因表达载体1中的位点

 

，应为限制酶Bgl II的识别位点，才能成功构建表达载体2．
（4）如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞，经胚胎培养后移入受体母牛子宫内可以被接受的原因是发情期母牛子宫对外来胚胎基本上不发生

 

反应；通过胚胎分割技术获得两个相同的胚胎技术要点是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的应用,胚胎移植

专题：

分析：据图分析，①表示转录提取信使RNA，②表示逆转录形成目的基因，③表示基因表达载体的构建．限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．胚胎移植中受体的子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．

解答： 解：（1）动物细胞培养所需要的条件是：95%空气和5%CO₂气体环境、适宜温度（37℃）和PH、无毒无菌的环境及合适的营养成分，其培养基中通常需加入血清、血浆等一些天然成分；图中②mRNA→cDNA，表示逆转录过程．
（2）构建基因表达载体时先用限制酶切割让质粒和目的基因的磷酸二酯键获得相同的黏性末端，然后在DNA连接酶的作用下重新组合：基因表达载体必须具备启动子、目的基因、终止子和标记基因等结构．
（3）根据目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ，所以表达载体1也必须有这两个酶切位点，表达载体1上已有EcoRⅠ，推测位点a应含有BglⅡ．
（4）胚胎移植时发情期母牛子宫对外来胚胎基本上不发生避免排异反应反应；通过胚胎分割技术获得两个相同的胚胎，需要将内细胞团均等分割．
故答案为：（1）37   95%空气和5%CO2    逆转录
（2）限制酶   终止子和标记基因
（3）a
（4）避免排异反应（或避免免疫排斥）内细胞团均等分割

点评：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释并做出合理判断的能力．