Question

PCR技术是一种DNA的扩增技术，操作步骤简介如下：
第一步：准备反应式溶液和模块DNA．
A．配制聚合酶链式反应溶液：
配方：按如下比例进行配制：蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1（防止聚合酶在冻结时受伤害）；dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5．
B．准备要拷贝的DNA：
提取准备要拷贝的DNA
（如可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动．加热蒸馏水沸腾，使细胞破碎放出DNA．用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片．这时上清液中就有了较纯的DNA．）
第二步：聚合酶链式反应．
①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中．
②水浴加热．首先，94℃，使DNA双螺旋解旋，历时1min；然后，56℃，使引物结合到DNA上，历时90s；最后，72℃，用聚合酶使DNA拷贝，历时90s．
③重复步骤②．每重复一次，即完成一次拷贝．
分析回答下列问题：
（1）以上材料可以说明

 

A．DNA的复制必须在活细胞内才能完成
B．DNA能指导蛋白质的合成
C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA复制
D．PCR技术是一种无性生殖技术
（2）为什么要加入两种引物．

 

．引物的作用是什么？

 

．
（3）PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在温泉中的一种细菌，就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是

 

．

Answer 1

考点：PCR技术的基本操作和应用

专题：

分析：解答本题需识记有关PCR技术的相关知识：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
2、原理：DNA复制．
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
4、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开．

解答： 解：（1）据材料可知，PCR为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．故说明在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA复制．
（2）由于DNA分子两条链是呈反向平行的，DNA聚合酶不能从头合成DNA分子，只能从3′端到5′端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，与DNA分子双链中的一条链互补．故引物的作用是引导DNA分子的复制．
（3）PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在温泉中的一种细菌，这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的不同点在于由于和高温环境相适应，故在较高温下不会变性失活．
 故答案为：
（1）C
（2）DNA分子两条链是呈反向平行的，DNA聚合酶不能从头合成DNA分子，只能从3′端到5′端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，与DNA分子双链中的一条链互补　引导DNA分子的复制
（3）较高温下不会变性失活

点评：本题考查PCR技术的相关知识，对于此类试题，学生需对相关知识进行归纳总结，构建一定的知识网络，本题意在考查学生的识记能力和理解能力．