题目内容
14．科研人员从荒漠植物中成功克隆抗旱功能基因培育出抗旱耐盐碱和耐贫瘠能力明显的转基因紫花苜蓿新品系，它的研究成功对改良与利用大面积盐荒地、改善生态环境以及促进农牧业可持续发展具有现实意义．结合所学知识回答下列问题．
（1）题目中“克隆”是指PCR技术，其原理为DNA复制．
（2）图1为某种常用质粒的序列图，LacZ基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Ampt为氨苄青霉素抗性基因．图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列．科研人员欲用BamHⅠ和Bg1Ⅱ两种限制酶切割目的基因和质粒后，筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有X-gal和氨苄青霉素，构建重组质粒时需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶．
（3）紫花苜蓿为双子叶植物，常用的导入目的基因的方法是农杆菌转化法．
（4）在对转基因植物进行个体水平的检测时，需将该植株栽培于干旱、盐碱和贫瘠环境中，以观察其生长状况．
（5）欲大规模的推广新品系，科研人员将转基因紫花苜蓿的胚状体制备成人工种子．
（6）在西北某些地区出现“前面造林，后面砍林”的现象，是因为发展中整体性原理失调造成的．
分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
解答 解：（1）题目中说的“克隆”实际上指的是PCR技术，即在分子水平上克隆DNA分子．PCR技术的原理是DNA复制．
（2）用BamHⅠ和Bg1Ⅱ两种限制酶切割目的基因和质粒后，质粒上的LacZ基因被破坏，而氨苄青霉素基因没有被破坏，其中LacZ基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色．因此筛选成功导入目的基因的重组质粒时，培养基中应加入的物质有X-gal和氨苄青霉素．构建重组质粒时，首先需要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒．
（3）将目的基因导入双子叶植物常用农杆菌转化法．
（4）对于目的基因的检测与鉴定，可以进行分子水平的检测，也可以进行个体水平的鉴定，进行个体水平上的鉴定时，需将该植株栽培于干旱、盐碱和贫瘠环境中，以观察其生长状况．
（5）人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子．
（6）在西北某些地区出现“前面造林，后面砍林”的现象，是因为发展中整体性原理失调造成的．整体性原理是在生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响．
故答案为：
（1）PCR DNA复制
（2）X-gal 限制酶、DNA连接酶
（3）农杆菌转化法
（4）干旱、盐碱和贫瘠
（5）胚状体
（6）整体性
点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记植物组织培养的过程及相关应用；识记生态工程的基本原理，能结合所学的知识准确判断各选项．
．| A． | 非同源染色体之间交换部分片段，属于突变 | |
| B． | 突变和自然选择均能定向改变种群的基因频率 | |
| C． | 种群基因型频率发生了定向改变，说明种群在进化 | |
| D． | 种群进化成新物种后与原物种不能进行自由交配 |
| A． | 高尔基体初步加工的蛋白质要运入内质网中进一步加工 | |
| B． | 破坏高尔基体会导致正在分裂的动物细胞染色体数目加倍 | |
| C． | 高尔基体上附着有大量的核糖体有利于对肽链的加工 | |
| D． | 细胞内的高尔基体膜可以转化为细胞膜或某些细胞器膜 |
为探究“影响酶活性的因素”，某同学设计了一个实验方案，见表：
试管 | 底物和试剂 | 实验条件 | |
1 | 1mL | 10%鸡蛋清溶液 | 37℃水浴 |
2 | 1mL | 10%鸡蛋清溶液+1mL胰蛋白酶 | 37℃水浴、pH为5 |
3 | 1mL | 10%鸡蛋清溶液+1mL胰蛋白酶 | ？ |
4 | 1mL | 10%鸡蛋清溶液+1mL胰蛋白酶 | 5℃水浴、pH为8 |
下面有关分析合理的是（ ）
A．3号试管的实验条件是37℃水浴，pH为8
B．1号试管设置正确合理，为空白对照组
C．实验想要探究影响酶活性的因素是温度
D．蛋清液和酶液应混合均匀后再进行水浴
