Question

16．长期以来，香蕉生产遭受病害的严重威胁，制约了其发展．目前，随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟，为培育抗病香蕉品种开辟了新途径．转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶切割位点．请回答：

（1）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：启动子、终止子，培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导人抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因，作为标记基因．
（2）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ，对含抗病基因的DNA和质粒进行切割．欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术抗原-抗体杂交技术．目的基因能都在真核细胞中稳定遗传的关键是目的基因插入了转基因生物染色体的DNA．
（3）香蕉具有不耐储存的特点，科学家把控制香蕉成熟的基因导入香蕉，获得转基因延熟香蕉，储存时间可以延长两个周．在延熟过程中，R蛋白起着很关键的作用．我们如果用蛋白质工程来生产R蛋白，应从预期的蛋白质的功能出发来设计预期的蛋白质结构，再推测应有的氨基酸序列．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位点．所以要构建重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割．
图中①表示脱分化过程、②表示再分化过程．

解答 解：（1）目的基因在受体细胞中表达，需要在前面接上启动子，是RNA聚合酶的结合位点，起始转录，在后面街上终止子，终止翻译．需要用的抗生素抗性基因做标记基因．
（2）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位，所以要构建重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割．欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术抗原-抗体杂交技术．目的基因能在香蕉细胞中稳定遗传的关键，转基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因．
（3）蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质的结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列．
故答案为：
（1）启动子、终止子   抗卡那霉素基因
（2）PstⅠ、EcoRⅠ抗原-抗体杂交技术   目的基因插入了转基因生物染色体的DNA
（3）预期的蛋白质的功能

点评 本题结合转基因抗病香蕉的培育过程图，着重考查了基因工程和植物细胞工程的相关知识，要求考生识记基因表达载体的构成部分，标记基因及目的基因表达产物的鉴定方式，重点考查学生对于课本内容的记忆．