Question

15．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如表：

KH2pO4	Na2HP04	MgS04•7H20	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	l．Og	10．Og	l．Og	15．Og

（1）根锯培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌不能 （能/不能），原因是培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源．
（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中活菌数．
（3）接种前要对培养基进行灭菌．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
（4）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高，应当怎样操作才可避免此种现象？对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数）．
（5）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是萃取法．对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的温度和时间，以防止胡萝卜焦糊．

Answer 1

分析 1、选择培养基的概念是：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长．
2、常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液涂布到固体琼脂培养基上，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，获得由单个细胞繁殖而来的菌落．

解答 解：（1）据题表分析，表中的配方不能筛选分离出尿素分解菌，原因是没有使用选择培养基，即培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出分解尿素的微生物．
（2）稀释涂布平板法接种常用来进行微生物的计数，统计平板上的菌落数目可以推测出样品中活菌数．
（3）接种前要对培养基进行灭菌．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
（4）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高，为避免此种现象，应对菌液进行梯度稀释．
（5）胡萝卜素是脂溶性物质，易溶于石油醚等脂溶性有机溶剂，可以使用萃取法提取胡萝卜素；对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的温度和时间，以防止胡萝卜焦糊．
故答案为：
（1）不能        培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源    
（2）稀释涂布平板          菌落数目    
（3）灭菌          无菌    
（4）菌液浓度过高          对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数）  
（5）萃取法       温度

点评 本题以培养基成分的表格为载体，主要考查尿素分解菌的筛选与分离，意在强化学生对相关知识点的识记与理解．