Question

13．日新月异发展的生物科学技术，解决了一些社会需求也带来了一些社会忧虑．回答下列问题：
（1）为制备单克隆抗体，需将抗原 注射到小鼠体内，以此获取浆细胞（或效应B）细胞，为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，可用选择 培养基达到目的．
（2）基因工程中的核心步骤是基因表达载体的构建，限制性核酸内切酶不能切割自身DNA的原因是不存在酶的识别序列（或识别序列已被修饰）．
（3）植物组织培养中，为了有利于嫩枝组织细胞启动细胞分裂形成愈伤组织，常常需要在配制好的培养基中添加植物激素（或生长素和细胞分裂素）．嫩枝组织细胞接种后2～5d时，若发现其边缘局部污染，原因可能是嫩枝组织细胞消毒不彻底．
（4）动物细胞培养中，使用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理动物组织，然后进行分散培养．培养时将培养瓶置于含95%空气和5%CO₂的混合气体培养箱中进行培养．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体．
2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）．
3、取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．

解答 解：（1）为制备单克隆抗体，需将抗原注射到小鼠体内，以此获取浆细胞（或效应B）细胞，为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，可用选择培养基达到目的．
（2）基因表达载体的构建是基因工程中的核心步骤，限制性核酸内切酶不能切割自身DNA的原因是不存在酶的识别序列．
（3）植物组织培养中，为了有利于嫩枝组织细胞启动细胞分裂形成愈伤组织，常常需要在配制好的培养基中添加植物激素（或生长素和细胞分裂素）．嫩枝组织细胞接种后2～5d时，若发现其边缘局部污染，原因可能是嫩枝组织细胞消毒不彻底．
（4）培养时将培养瓶置于含95%空气和5%CO₂的混合气体培养箱中进行培养．
故答案为：
（1）抗原    　   浆细胞（或效应B）      　  选择
（2）基因表达载体的构建（答“基因表达载体”不给分）      不存在酶的识别序列（或识别序列已被修饰）
（3）植物激素（或生长素和细胞分裂素）    　 嫩枝组织细胞消毒不彻底
（4）95%空气和5%CO₂

点评 本题考查单克隆抗体、植物组织培养和动物细胞培养，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．