Question

某研究性学习小组同学想了解车厢“拉环”细菌的种类与含量对公众健康的影响，选择了地铁公交作为研究对象．他们设计了有关的实验．
他们收集了有关的资料如下：
按照细菌对革兰氏染色的反应，可将细菌分为革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌．
牛肉膏蛋白胨培养基，革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌均可生长，可用于细菌总数测定．麦康凯琼脂培养基，能抑制革兰氏阳性菌生长，是革兰氏阴性菌的选择培养基．革兰氏阴性菌能分解乳糖产生乳酸的菌落，其周围pH值降低因而菌落为红色，不能分解乳糖的菌落（通常为致病菌）为白色．
产乳酸的革兰氏阴性菌常用来指示肠道细菌的存在，表明可能存在肠道病原体污染，其中既有非致病菌，也有致病菌．常将此类细菌作为监测环境卫生的指标．
《中华人民共和国国家标准---医院消毒卫生标准GB15982-1995》规定，医院普通病房、换药治疗室允许的总细菌数＜10cfu/cm²，即＜10个（菌落）/cm²．
（一）材料与方法．
1、取样方法和过程：用浸有生理盐水的棉球涂抹拉环后放入装有3mL生理盐水的试管，试管放置在盛有冰块的冰盒内条件下为宜，原因是

 

．采集样品所用的生理盐水、棉球、离心管等材料需作

 

处理．
2、细菌培养：将装有取样棉球的试管在振荡器上剧烈振荡5s，使细菌均匀分散于生理盐水中．下列是细菌培养实验过程，请在A、B（如图）空格内写出相应的操作内容．细菌计数：培养48小时后，对培养皿进行菌落计数：

（1）在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落，计为

 

总数；
（2）在麦康凯培养基上的菌落，计为

 

总数．其中红色菌落为

 

菌，白色菌落为

 

菌．
（二）结果与讨论
地铁拉环表面的平均细菌分布表（每个拉环手触部分面积计为60cm²）：

项目	细菌数/拉环
平均细菌总数	532.4
单位面积平均细菌总数cfu/cm2	8.9
平均革兰氏阴性菌总数	232.3
单位面积平均革兰氏阴性菌总数cfu/cm2	3.9
单位面积平均乳糖发酵菌数cfu/cm2	2.1
单位面积平均非乳糖发酵菌数cfu/cm2	1.8
革兰氏阴性菌占细菌总数比例	44%

讨论：根据国家标准，参照上表数据，你可以得出什么结论？

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：解答本题需掌握：
（1）按照细菌对革兰氏染色的反应，可将细菌分为革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌．
（2）牛肉膏蛋白胨培养基，革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌均可生长，可用于细菌总数测定．麦康凯琼脂培养基，能抑制革兰氏阳性菌生长，是革兰氏阴性菌的选择培养基．革兰氏阴性菌能分解乳糖产生乳酸的菌落，其周围pH值降低因而菌落为红色，不能分解乳糖的菌落（通常为致病菌）为白色．

解答： 解：（一）1、在取样过程中，用浸有生理盐水的棉球涂抹拉环后放入装有3mL生理盐水的试管，试管放置在盛有冰块的冰盒内条件下为宜，原因是减少取样细菌分裂增殖，采集样品所用的生理盐水、棉球、离心管等材料需作高压蒸汽灭菌．
2、由题意知，A、B处理分别是取等量菌液样品涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上和取等量菌液样品涂布于麦康凯培养基上．
（1）牛肉膏蛋白胨培养基是通用培养基，不具有选择作用，故统计的是细菌总数．
（2）麦康凯培养基具有选择作用，故统计的是革兰氏阴性菌落，其中红色菌落为乳糖发酵菌，白色菌落为非乳糖发酵菌．
（二）由表可知，拉环单位表面积平均细菌总数有8.9 cfu/cm²，小于10 cfu/cm²，即＜10个（菌落）/cm²，单位面积平均革兰氏阴性菌总数3.9cfu/cm²，乳糖发酵细菌2.1cfu/cm²，非乳糖发酵菌数1.8cfu/cm²，因此，可以认为地铁总细菌含量相对较少，致病菌数量较少，对公众安全不构成威胁．
故答案为：
（一）1、减少取样细菌分裂增殖    高压蒸汽灭菌
2、A：取等量菌液样品涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上       B：取等量菌液样品涂布于麦康凯培养基上
（1）细菌   
（2）革兰氏阴性菌落    乳糖发酵    非乳糖发酵
（二）拉环单位表面积平均细菌总数有8.9 cfu/cm²，小于10 cfu/cm²，即＜10个（菌落）/cm²，单位面积平均革兰氏阴性菌总数3.9cfu/cm²，乳糖发酵细菌2.1cfu/cm²，非乳糖发酵菌数1.8cfu/cm²，因此，可以认为地铁总细菌含量相对较少，致病菌数量较少，对公众安全不构成威胁

点评：本题主要考查微生物的实验室培养、实验设计的相关知识，意在考查考查考生对相关知识的理解，把握知识间的内在联系的能力．