Question

15．回答下列关于微生物的间题：
Ⅰ．检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施．请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题：
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为稀释涂布平板法．
如图所示的四种菌落分布图中，图D不是由该方法得到的．

（2）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL．转至盛有9mL．无菌水的试管中，依次稀释至103 稀释度．各取0.1mL 已稀释103 倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55，56，57．则每升原水样中大肠杆菌数为5.6×10⁸个．
（3）有三种材料或用具需要清毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手•其中需要消毒的是③（填序号），需要灭菌的是①②（填序号）．
Ⅱ如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方．

成分	蛋白胨、牛肉膏	乳糖	蔗糖	K2HPO4	显色剂	琼脂
含量（g）	10.0g	5.0g	5.0g	2.0g	0.2g	12.0g
将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1000mL

（1）根据用途划分该培养基属于选择培养基（填“选择”或“鉴别”）．该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨．
（2）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是BC（多选）
A．制作果酒　B．由果酒制作果醋　C．制作泡菜　D．制作腐乳．

Answer 1

分析 1、根据题意和图示分析可知：A、B、C三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，D培养皿是平板划线法接种．
2、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．由图中四种菌落分布情况可知，图D 是利用平板划线法得到的．
（ 2 ） 首先计算三个培养基菌落数的平均值，然后再计算每升原水样中大肠杆菌数，即（ 55+56+57 ）÷3×10000×1000=5.6×10⁸个．
（3）实验操作者的双手需要进行消毒处理，而培养细菌用的培养基与培养皿需要采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，玻棒、试管、烧瓶和吸管等需要采用干热灭菌法进行灭菌．
（4）该培养基中含有显示剂，属于鉴别培养基；该培养基的碳源是乳糖、蔗糖、蛋白胨、牛肉膏；与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入植物激素（或生长素和细胞分裂素）．
（5）参与果酒制作的是酵母菌，属于真核生物；参与果醋制作的是醋酸菌，属于原核生物；参与泡菜制作的是乳酸菌，属于原核生物；参与腐乳制作的是毛霉等微生物，属于真核生物．大肠杆菌是原核生物，所以细胞结构与大肠杆菌相同的是B、C．
故答案为：
Ⅰ（1）稀释涂布平板法    D
（2）5.6×10⁸
（3）③①②
Ⅱ•（1）选择     乳糖、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨
（2）BC

点评 本题结合图解，考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法，能正确判断图中所用的接种方法，再结合所学的知识准确答题．