Question

2．如图为培育转基因抗虫棉的技术流程，请据图回答：

（1）过程①是基因表达载体的构建，其组成除了目的基因外还必须有启动子、终止子以及标记基因．
（2）在利用构建重组质粒的过程中，常需使用限制酶和DNA连接酶．
（3）过程②采用最多的方法是农杆菌转化法，检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上可采用DNA分子杂交技术．
（4）获得目的基因过程中，常用的方法有两种途径：一是以抗虫基因的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需基因．另一种方法是利用PCR扩展DNA，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、Taq酶、4种脱氧核苷酸、模板DNA．扩增过程可以再PCR扩增仪中进行．

Answer 1

分析 分析题图：图示为培育转基因抗虫棉的技术流程，其中①是基因表达载体的构建过程，②是将目的基因导入受体细胞的过程，③是脱分化过程，④是再分化过程．

解答 解：（1）过程①是将目的基因和质粒重组成重组质粒的过程，即基因表达载体的构建；基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因等．
（2）构建基因表达载体时，首先需要用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，使它们露出相同的末端，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA．
（3）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；检测目的基因是否导入受体细胞可采用DNA分子杂交技术．
（4）获得目的基因过程中，常用的方法有两种途径：一是以抗虫基因的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需基因．另一种方法是利用PCR扩展DNA，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、Taq酶、4种脱氧核苷酸、模板DNA．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建      启动子      终止子
（2）限制性核酸内切酶       DNA连接酶
（3）农杆菌转化法       DNA分子杂交技术
（4）逆转录酶      DNA聚合酶      引物     Taq酶

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．