题目内容
（10分）人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。+大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入“雌性奶牛胚胎”的细胞中，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）重组细胞①和②中 （①／②）实现了基因的重组。
（2）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是 。
（3）实验过程b利用的技术是 ，胚胎工程操作中最后环节
是 。
（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型
（相同／不同） ，理由是 ，此项技术称为 。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中作为饲养层的是 细胞。
（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及 等物质。
（10分）(1)① （2）雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白 （3）核移植 胚胎移植 （4）相同 它们来自同一个受精卵 胚胎分割（5）胰蛋白酶 胚胎成纤维 (6) 动物血清
解析试题分析：本题考查胚胎工程、基因的表达、细胞核移植等技术，属于考纲综合运用层次。（1）基因表达包括转录和翻译。重组细胞①实现了基因的重组，重组细胞②实现了细胞核和细胞质的重组。（2）雌性奶牛能分泌乳汁，故过程a需要选择雌性奶牛的胚胎。（3）过程b利用了细胞核移植的技术，胚胎工程的最后一个环节是胚胎移植。（4）早期胚胎分离成的若干胚胎细胞发育成的小牛基因型是相同的，因为这些胚胎干细胞都是同一个受精卵经过有丝分裂得到的。（5）动物细胞培养过程中，特点是贴壁生长和接触抑制，要用胰蛋白酶处理，加入成纤维细胞作为饲养层细胞。(6)动物细胞培养的天然营养物质是动物血清。
考点：本题考查胚胎工程、基因的表达、细胞核移植等技术，属于考纲综合运用层次。意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
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（10分）mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA（限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示），然后通过凝胶电泳分离DNA片段（通电状态下，不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离），分析后得到下表。
| 凝胶电泳结果（1kb=1000对碱基） （数字表示该片段的存在以及数量） | |||
| 分子量（kb） | 酶M | 酶N | 酶M+酶N |
| 1.0 | 1 | | 1 |
| 2.0 | | | 1 |
| 3.0 | | | 1 |
| 4.0 | | | 1 |
| 5.0 | 1 | | |
| 6.0 | | | 1 |
| 7.0 | | 1 | |
| 9.0 | | 1 | |
| 10.0 | 1 | | |
（1）该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点分别有____________个。
（2）M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割，请简述理由：________________________________________。
（3）图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因，可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便，但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此，目前往往采用逆转录的人工合成的方法，其基本步骤是：__________________。
图2
（4）已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G 和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。
