Question

16．青蒿素是从黄花蒿茎叶中提取的抗疟疾药物．通过组织培养获得青蒿素的途径如图所示．请回答：

（l）图中①和②分别表示黄花蒿组织培养过程中细胞的脱分化和再分化过程．
（2）配制生芽培养基时生长素比细胞分裂素的比值应较低（填“高”或“低”）．配制培养基时通常加入凝固剂琼脂．外植体在接种前通常可用体积分数为70%的酒精进行消毒．
（3）为了得到高产细胞系，通常要用酶解法获得原生质体，用果胶酶和纤维素酶酶去壁．
（4）科研人员利用转基因技术用细菌作为工程菌获得青蒿素．先将目的基因与含有抗青霉素基因的质粒形成重组质粒（重组DNA分子或基因表达载体），在菌液中与用Ca²⁺处理的能够吸收环境中DNA分子分子的感受态细菌混合完成目的基因的导入．将稀释后的菌液用涂布法接种到含青霉素
的固体培养基上，经培养形成单菌落，再进一步筛选和培养．若最终能从细菌中提取到青蒿素，则说明转基因成功．

Answer 1

分析 分析题图：①和②是植物组织培养过程，其中①是脱分化过程、②是再分化过程．一个途径是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；另一个途径是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物．

解答 解：（1）植物组织培养的关键过程包括脱分化和再分化．
（2）图中培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化．加入琼脂形成固体培养基．外植体在接种前通常可用体积分数为70%的酒精进行消毒．
（3）植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，在获得植物原生质体时，需要用纤维素酶和果胶酶混合液处理实验材料，将细胞壁消化除去．
（4）基因工程过程中，先将目的基因与含有抗青霉素基因的质粒形成重组质粒；受体细胞为微生物时，一般采用钙离子转化法，即在菌液中与用Ca²⁺处理的能够吸收环境中DNA分子分子的感受态细菌混合完成目的基因的导入．用玻璃刮刀将稀释后的菌液用涂布法接种到含青霉素的固体培养基上，经培养形成单菌落，再进一步筛选和培养．若最终能从细菌中提取到青蒿酸，则说明转基因成功．
故答案为：
（1）脱分化   再分化    
（2）低   琼脂    70%
（3）果胶酶和纤维素酶
（4）重组质粒（重组DNA分子或基因表达载体）      Ca²⁺   DNA分子     涂布   青霉素   青蒿素

点评 本题结合获取青蒿素示意图，考查植物组织培养和基因工程的相关知识，要求考生能够识记植物组织培养的过程，掌握培养基配置的方法步骤，识记基因工程的操作步骤，再结合所学知识准确答题．