Question

【题目】某学习小组进行“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”的探究实验。

（1）本实验中，某学生的部分实验操作过程是这样的：①把酵母菌培养液放置在适宜的环境中培养，第7天开始取样计数；②用无菌吸管从静置试管中吸取酵母菌培养液少许；③加入血细胞计数板计数室，再盖上盖玻片，并用滤纸吸去多余菌液。请纠正该同学实验操作中的三个错误。

①___________________________________；②__________________________________；③___________________________________。

（2）用血细胞计数板计数前，通常需要将酵母菌样稀释，这是因为___________。

（3）血细胞计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻璃制品，样品滴在计数室内，每个计数室容纳液体的总体积为 0.1mm3。

现观察到图中所示 a、b、c、d、e 中共有酵母菌 44 个，其中被台盼蓝染成蓝色的有 4 个，则上述1mL酵母菌样品中应该统计的菌体数_______ 个，对于压在小方格界线上的酵母菌应如何计数？_______________________________。

Answer 1

【答案】第一天开始取样计数，连续七天 取样前振荡试管 先盖上盖玻片，再加入血细胞计数板计数室 酵母菌密度太大 2×106 计相邻两边及其顶角的酵母菌

【解析】

探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化，第一天开始取样计数，连续7天在同一时间计数。对酵母菌进行计数可采用抽样检测法：先将盖玻片放在计数室上，再在盖玻片边缘滴一滴培养液，让培养液自行渗入。血细胞计数板边缘多余培养液用滤纸吸去。将计数板放在载物台中央，待酵母菌沉降到计数室底部，在显微镜下观察、计数。

（1）①第一天开始取样计数，连续7天。②为酵母菌分布均匀，取样前振荡试管。③先盖上盖玻片，再加入血球计数板计数室。

（2）用血细胞计数板计数前，通常需要将酵母菌样稀释，这是因为酵母菌密度太大。

（3）由于细胞膜具有选择透过性，台盼蓝染液不能通过活细胞的细胞膜进入细胞，而死细胞的细胞膜失去选择透过性，变为全透性，因此实验中被台盼蓝染液染色的细胞为死细胞,这样图中所示a、b、c、d、e 5个中格内有酵母菌44-4=40个，平均每个中格有8个，计数室有25个中方格，共计有酵母菌8×25=200个。计数区体积为=0.1 mm3，换算成1mL，则有酵母菌200×103个，再乘以稀释倍数10，结果为2×106个/mL。对于压在小方格界线上的酵母菌应计相邻两边及其顶角的酵母菌。