Question

15．萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶：α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶耐热不耐酸；β-淀粉酶耐酸不耐热，70℃处理15min即变性失活．为测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异，将发芽3天的大麦种子加蒸馏水研磨匀浆、离心取上清液得到淀粉酶提取液，进行如下实验．

操作步骤		1号试管	2号试管	3号试管
①	加淀粉酶提取液	1ml	1ml	1ml
②	预处理	70℃恒温水浴15min， 取出冰浴中冷却	高温使α-淀粉酶 和β-淀粉酶失活	不处理
③	加缓冲液	2ml	2ml	2ml
④	预保温	40℃恒温水浴 10min
⑤	加40℃预热的 淀粉溶液	2ml	2ml	2ml
⑥	保温	40℃恒温水浴5min
⑦	测定	加入试剂X，50～65℃水浴5min，测定砖红色沉淀物的量

回答下列问题：
（1）步骤⑦中加入的试剂X为斐林试剂．
（2）上述实验操作步骤中，步骤②中对1号试管进行操作的目的是使β-淀粉酶变性失活；为达成实验目的，设置的1、2、3号试管中，为对照组的一组是2号试管．
（3）通过上述实验，能大致比较萌发3天时种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小．比较的方法是测定各试管沉淀物的量，1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示该酶的活性大．

Answer 1

分析 本实验的目的是测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异；发的大麦种子中存在着两种淀粉酶：α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶耐热不耐酸；β-淀粉酶耐酸不耐热，70℃处理15min即变性失活．若测定大麦种子中α-淀粉酶催化效率，因此要根据β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干扰．淀粉酶能将淀粉水解成还原糖，而还原糖可以用斐林试剂进行鉴定．

解答 解：（1）本实验的目的是测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异，淀粉酶分解淀粉为还原糖，还原糖可以用斐林试剂进行鉴定，步骤⑦中加入的试剂X为斐林试剂．
（2）β-淀粉酶耐酸不耐热，70℃处理15min即变性失活．上述实验操作步骤中，步骤②中对1号试管进行操作的目的是使β-淀粉酶变性失活，测定大麦种子中α-淀粉酶催化效率，为达成实验目的，设置的1、2、3号试管中，为对照组的一组是2号试管（2号试管α-淀粉酶和β-淀粉酶均失活，不能将淀粉变为还原糖，2号和1号对比能测定α-淀粉酶催化效率）．
（3）通过上述实验，可以测定各试管沉淀物的量，1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示该酶的活性大，从而能大致比较萌发3天时种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小．
故答案为：
（1）斐林试剂
（2）使β-淀粉酶变性失活    2
（3）测定各试管沉淀物的量，1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示该酶的活性大

点评 本题结合图表，考查探究影响酶活性的因素、检测还原糖实验、探究实验，要求考生能根据题干信息“α-淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活，而β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活”完善实验步骤，能还原糖检测实验的原理对实验进行检测．