Question

2．以下为人工合成reAnti基因，转入猪成纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
（1）构建的重组质粒除了要有reAnti基因和标记基因外，还要有（Anti基因的）启动子终止子和复制原点．
（2）从猪中取胎儿成纤维细胞，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，然后进行分散培养，培养时，将培养瓶置于含95%空气加5%CO₂的混合气体培养箱中进行培养．
（3）去核前的卵母细胞应培养到MII中期．其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞，再利用物理或化学方法刺激，使之完成细胞分裂和发育，在体外培养成重组早期胚胎．
（4）在进行过程⑦操作前，应用激素对受体母猪进行同期发情处理．

Answer 1

分析 分析题图：①是获取目的基因的过程；②是基因表达载体的构建过程；③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程；④采用显微技术去核；⑤是核移植过程；⑥动物细胞培养过程；⑦是胚胎移植过程；⑧是妊娠形成转基因克隆猪的过程．

解答 解：（1）基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子和终止子，所以构建的重组质粒除了要有reAnti基因和标记基因外，还要有启动子和终止子．
（2）动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，使动物细胞分散成单个细胞．动物细胞培养时要放入到95%的空气（保证细胞代谢）和5%CO₂（调节培养液的PH）培养箱中．
（3）去核前的卵母细胞应培养到减数第二次分裂中期才成熟，其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞，再利用物理或化学方法刺激，使之完成细胞分裂和发育，在体外培养成重组早期胚．
（4）在进行胚胎移植前，需要对受体进行同期发情处理，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境．
故答案为：
（1）（Anti基因的）启动子  终止子  
（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）     95%空气加5%CO₂
（3）MII中    
（4）同期发情

点评 本题结合转基因克隆猪的培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤及应用；识记动物细胞培养的过程及条件；识记胚胎工程的相关技术，能准确判断图中各过程的含义，再结合所学的知识答题．