Question

【题目】如图是利用农杆菌转化法培育转苏云金杆菌（Bt）毒素蛋白基因植物的过程示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），表格内是3种相关限制酶的识别序列与酶切位点示意图．

（1）图过程②是基因工程基本步骤，称为_____。

（2）运用HindⅢ与BamHI酶切目的基因与质粒，并加入DNA连接酶来构建重组质粒的方法的缺点是_____。．为了改善上述问题，可以改用_____酶。

（3）本实验选用的运载体是图中的_____，他们的基本单位是_____。

（4）下列关于质粒运载体的说法正确的是_____。

A．质粒运载体作用之一是防止目的基因被核酸酶降解

B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞

C．目的基因插人质粒后，不能影响质粒运载体的复制和表达

D．③中Ti质粒的T﹣DNA片段可以协助目的基因导入植物细胞

E．没有限制酶就无法使用质粒运载体

Answer 1

【答案】将目的基因与运载体重组 该种方法会产生4种重组质粒，不利于筛选 BstI或BamH I pBR质粒和Ti质粒 脱氧核苷酸 ACDE

【解析】

（1）据图分析，图1中②表示基因表达载体的构建过程。

（2）运用HindⅢ与BamHI酶切目的基因与质粒，并加入DNA连接酶来构建重组质粒的方法会产生4种重组质粒，不利于筛选。为了改善上述问题，可以改用BstI或BamHI酶。

（3）由图可知，本实验选用的运载体是pBR质粒和Ti质粒，它们都是双链环状DNA分子，因此基本单位是脱氧核苷酸。

（4）A、质粒运载体作用之一是防止目的基因被核酸酶降解，A正确；

B、质粒运载体本身可以进入细胞，不一定要与目的基因重组，B错误；

C、目的基因插人质粒后，不能影响质粒运载体的复制和表达，C正确；

D、Ti质粒的T-DNA片段可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此可以协助目的基因导入植物细胞，D正确；

E、作为运载体要有限制酶的切割位点，因此没有限制酶就无法使用质粒运载体，E正确。

故选ACDE。