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[生物——选修3:现代生物科技专题]科学家从某细菌中提取抗冻基因,转入番茄并培育出抗冻番茄。下图是转抗冻基因番茄的培育过程,含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。分析回答问题:

(1)若要获得抗冻基因,可以从细菌中提取;也可以通过分析抗冻蛋白 的序列推测基因的结构,进而人工合成抗冻基因。对获得的抗冻基因可用 技术进行扩增。

⑵上述两种途径获得的抗冻基因 (填“是”或“否”)一定相同,原因是

(3)用图中的质粒和抗冻基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是 。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用 酶对外源DNA、质粒进行切割。

(4)图中过程⑤表示

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