Question

基因工程中，须使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是(　　)

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

D

解析试题分析：原则上质粒或目的基因上都用不同的限制酶切割，避免切割后在自我组合，但质粒上两个标记基因分别含有两种酶的切割位点，故只能切一处，然而限制酶II识别的序列，在限制酶I的识别序列中能够找到若用限制酶II且则两种标记基因全部被破坏所以质粒只能用限制酶I切，而目的基因两侧的限制酶的识别序列两种酶各有一处，故用两种酶或能够识别两序列，且有切割位点的一种酶切，才能获得目的基因，所以用限制酶II在目的基因两侧分别切出相同的黏性末端，综上所述D正确。
考点：本题考查基因工程限制酶的内容，意在考查考生对限制酶应用的把握和理解。