Question

如图一表示某一种质粒的结构和部分碱基序列．现有BamHⅠ、MboⅠ2种限制性核酸内切酶，切割的碱基序列如图二所示．请回答下列问题：
（1）图一质粒用BamHⅠ、MboⅠ2种限制性核酸内切酶完全酶切后，可以获得

 

种不同长度的DNA片段．
（2）目的基因与图一质粒经过同种限制酶处理，形成重组质粒，选择的限制酶是

 

．
（3）不含有图一质粒的细菌在导入重组质粒后，在添加青霉素的培养基上培养，存活的细菌类型是

 

；在添加卡那霉素的培养基上培养，存活的细菌类型有

 

．
（4）卡那霉素能抑制植物叶绿体中色素的形成，抗卡那霉素基因是转基因植物中广泛使用的标记基因，其安全性问题可能表现在

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析质粒示意图：质粒上含有2个BamHⅠ酶切割位点，含有1个MboⅠ酶切割位点，其中BamHⅠ酶也能作用于BamHⅠ酶的切割位点．所以用BamHⅠ、MboⅠ2种限制性核酸内切酶完全酶切后，可以获得3种不同长度的DNA片段．切割目的基因与质粒时，应选用MboⅠ酶．

解答： 解：（1）由图可知，质粒上含有2个BamHⅠ酶切割位点，含有1个MboⅠ酶切割位点，因此图一质粒用BamHⅠ、MboⅠ2种限制性核酸内切酶完全酶切后，可以获得3种不同长度的DNA片段．
（2）用BamHⅠ酶切割质粒时，会同时破坏质粒上的青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因，所以应用MboⅠ酶切割目的基因与质粒，再用DNA连接酶将两者连接形成重组质粒．
（3）因为重组质粒的青霉素抗性基因被破坏，而卡那霉素抗性基因完好，所以导入重组质粒的大肠杆菌能在含有卡那霉素的培养基上生存，但不能在含有青霉素的培养基上生存．在添加青霉素的培养基上培养，存活的细菌是不含重组质粒的；在添加卡那霉素的培养基上培养，存活的细菌是含有重组质粒或普通质粒的．
（4）卡那霉素能抑制植物叶绿体中色素的形成，抗卡那霉素基因是转基因植物中广泛使用的标记基因，其安全性问题可能表现在食品安全、生物安全、环境安全．
故答案：（1）3　
（2）MboI
（3）不含重组质粒　含有重组质粒或图一质粒
（4）食品安全、生物安全、环境安全

点评：本题结合质粒示意图，考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点的能力；能分析题图提取有效信息的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断和得出正确的判断的能力．