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1．利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术．1987年美国科学家Gordon等人首次从小鼠的乳汁中获得了一种医用蛋白质-tPA（组织型纤溶酶原激活物），开辟了基因工程产品生产的新方式．2005年我国青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制“项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生β-干扰素（抗病毒抗肿瘤药物）、乙肝表面抗原（乙肝疫苗）、抗凝血酶Ⅲ（抗血栓药物）等医药产品，造福人类健康．请根据这一科技成果的研究过程回答问题．
（1）该项目研究过程中，科研人员利用合成上述药物的三种基因成功构建了含有目的基因、启动子、终止子和标记基因的基因表达载体，然后用显微注射技术导入山羊胚胎细胞中，并获得了含有这三种基因的细胞株．
（2）将含有这三种基因的细胞在体外培养时，必须满足无菌无毒、营养、适宜温度和pH、气体环境等条件，才能使细胞大量增殖．
（3）提取上述细胞的细胞核，转移到去核的卵细胞内，然后构建重组胚胎，再将这种胚胎移入代孕母羊体内，则可产出能生产这三种药物的奶山羊．此过程中，要用去核的卵细胞作为受体，其原因是卵细胞内具有使体细胞核全能性表达的有利条件．
（4）请列举这一科技成果的研究过程运用了哪些现代生物科学技术？基因工程、细胞工程、胚胎工程．
（5）该项目成功通过鉴定的关键是什么？崂山奶山羊可稳定分泌含有三种药用蛋白的乳汁．

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的PH）．

解答 解：（1）基因表达载体包括：目的基因、启动子、终止子和标记基因；显微注射法是将目的基因导入动物细胞最有效的方法．
（2）将含有这三种基因的细胞在体外培养时，必须满足无菌无毒、营养物质、适宜温度和pH、气体环境等条件，才能使细胞大量增殖．
（3）卵细胞内具有使体细胞核全能性表达的有利条件，因此细胞核移植过程中，需要提取上述细胞的细胞核，转移到去核的卵细胞内，然后构建重组胚胎．
（4）这一科技成果的研究过程运用到的现代生物科学技术包括基因工程、细胞工程和胚胎工程．
（5）该项目成功通过鉴定的关键是目的基因成功地导入并在崂山奶山羊乳腺中得以表达（或崂山奶山羊乳腺已经合成出三种药用蛋白β一干扰素、乙肝表面抗原、抗凝血酶Ⅲ）．
故答案为：
（1）启动子   标记基因   显微注射
（2）营养   适宜温度和pH    气体环境
（3）卵细胞内具有使体细胞核全能性表达的有利条件
（4）基因工程    细胞工程    胚胎工程
（5）崂山奶山羊可稳定分泌含有三种药用蛋白的乳汁

点评 本题以““崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”为背景，考查了基因工程、细胞工程和培养过程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作过程及应用；识记动物细胞培养的条件，能运用所学的知识答题．

练习册系列答案
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（3）请找出“百草园”中体现生态系统信息交流的一个例子：鸣蝉长吟、蟋蟀弹琴等．
写出上述百草园中所涉及的所有生物构成的最长的食物链：植物→鸣蝉→云雀；
（4）如表为百草园40年间的变化情况：
14152540
草本2827263034
灌木0341219
乔木0001423
总计2830305676
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