Question

5．如图表示用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白过程，请据图回答：

（1）基因工程操作过程中需要大量的目的基因，若从生物组织中提取到少量含目的基因的DNA，可通过PCR技术扩增出大量目的基因，但是此方法要求目的基因序列部分已知，以便根据序列合成引物．
（2）构建重组载体时应选择图中BamHI和HindIII酶切割含有目的基因的DNA片段和质粒．
（3）图中重组载体的启动子是牛乳腺蛋白基因启动子．
（4）②过程是胚胎移植，此过程前通常需要利用DNA分子分析（DNA分子杂交或SRY-PCR）方法，在分子水平上进行性别鉴定．
（5）若要生产大量的人乳铁蛋白，可通过动物体细胞核移植（或克隆）或胚胎分割技术增加转基因牛的数量实现．

Answer 1

分析 转基因动物培育用到的技术：基因工程、动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植；胚胎工程中要用到技术：体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术；核移植用到的技术：动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植等．
结合题意分析图解：图中质粒包括四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因、启动子、复制原点，以及两个限制酶切点，并且两个限制酶切点的位置均在四环素抗性基因上；目的基因上有三个限制酶切点，与质粒对照，共有的是BamH I、Hind III．
图中①表示目的基因导入受体细胞，②表示通过胚胎移植的方式将早期胚胎移植到代孕母牛体内．

解答 解：（1）PCR扩增技术可以体外扩增大量目的基因，需啊目的基因序列部分已知，以便根据序列合成能与它配对的引物．
（2）由图中信息可知，载体上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位点，目的基因上也有它们的酶切位点，应用此2种酶切．
（3）能让目的基因开始表达的是启动子，启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度，即图中重组载体的启动子是牛乳腺蛋白基因的启动子．
（4）②过程是胚胎移植，可以取滋养层细胞利用DNA分子分析（DNA分子杂交或SRY-PCR）方法进行性别鉴定．
（5）对早期胚胎进行切割，经过程胚胎移植过程可获得多个新个体都发育成了个体．因此若要生产大量的人乳铁蛋白，增加转基因牛的数量实现，需要动物体细胞核移植（或克隆）和胚胎分割技术．
故答案为：
（1）PCR   引物    
（2）BamHI和HindIII
（3）牛乳腺蛋白基因
（4）胚胎移植     DNA分子分析（DNA分子杂交或SRY-PCR）
（5）动物体细胞核移植（或克隆）  胚胎分割

点评 本题难度适中，属于考纲中识记、理解层次的要求，着重考查了基因工程的限制酶的作用特点、启动子的功能、目的基因导入动物细胞的方法等相关知识，要求考生具有一定的识图能力，并能识记相关基础知识．