题目内容

下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图,所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒导入细菌B后,其上的基因能得到表达。请回答下列问题:(注:质粒中的a点即是四环素抗性基因的存在位置,又是与目的基因的结合点;斜线部分为抗氨苄青霉素基因)

(1)人工合成目的基因的途径一般有哪两条?

(2)如何将目的基因和质粒结合成重组质粒?

(3)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高,导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有极少数导入的是重组质粒。可通过以下步骤鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒;将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就是导入了质粒A和重组质粒的细菌,反之则没导入。使用这种方法鉴别的原因是什么?

(4)若把通过鉴定证明导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,发生的现象是什么?

(5)导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么?

答案:
解析:

  (1)①将从细胞中提取分离出的目的基因作为模板,转录成mRNA单链DNA双链DNA;②据蛋白质中氨基酸序列mRNA中碱基序列DNA碱基序列目的基因。

  (2)①用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有粘性末端的切口;②用同种限制酶切割目的基因,产生相同的粘性末端;③将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处,再加入适量的DNA连接酶,使质粒与目的基因结合成重组质粒。

  (3)普通质粒A和重组质粒都含有抗氨苄青霉素基因。

  (4)有的能生长,有的不能生长。导入普通质粒A的细菌能生长,因为普通质粒A上有抗四环素基因;导入重组质粒的细菌不能生长,因为目的基因插在抗四环素基因中,抗四环素基因的结构被破坏。

  (5)受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质,即人的生长激素


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